Mine otse sisu juurde
IM-9
Kude
Luuüdi
Sünonüümid
IM 9, IM9, GM04680

Dokumendid

IM-9

Cell line · Toote number 302151

IM-9 is a human lymphoblastoid cell line established in 1967 from the bone marrow of an adult woman diagnosed with multiple myeloma. Originally believed t...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

IM-9 on inimese lümfoblastoidne rakuliin, mis loodi 1967. aastal täiskasvanud naise luuüdist, kellel oli diagnoositud hulgimüeloom. Algselt arvati, et see on saadud müeloomirakkudest, kuid hilisemad uuringud, sealhulgas Pellat-Deceunynk jt 1995. aastal avaldatud tulemused, on näidanud, et IM-9 rakud on pigem Epstein-Barr-viiruse positiivsed (EBV+) B-lümfoblastoidirakud kui pahaloomulised müeloomirakud. See eristamine on seda rakuliini kasutavate teadlaste jaoks ülioluline, kuna see mõjutab müeloomi uuringutega seotud katsetulemuste tõlgendamist.

IM-9 rakke on kirjanduses põhjalikult iseloomustatud ja neid on täheldatud immunoglobuliin G (IgG) sünteesimise poolest. Samuti on teada, et nad ekspresseerivad insuliini ja kaltsitoniini retseptoreid, mis muudab nad väärtuslikuks hormoonide ja retseptorite koostoimete uurimiseks. Lisaks ekspresseerivad need rakud BCL2 mRNA-d, mis on apoptoosi reguleerimises osalev geen, mida uuritakse sageli vähi ja immuunrakkude ellujäämise kontekstis. Kuna IM-9 rakud ekspresseerivad palju insuliiniretseptoreid, kasutatakse neid sageli insuliinisignaalide ja ainevahetushäirete uurimisel, mis annab ülevaate insuliiniresistentsuse mehhanismidest.

IM-9 rakuliin on jätkuvalt oluline ressurss mitmesuguste teadusuuringute jaoks, eriti immunoloogia, vähibioloogia ja ainevahetuse uuringute valdkonnas. Võttes arvesse nende päritolu muudetud arusaamist, on siiski oluline kasutada IM-9 rakke, tunnistades, et need ei ole pahaloomuliste müeloomirakkude representatiivsed. Nagu alati, on need rakud mõeldud üksnes in vitro uuringuteks ja ei sobi terapeutiliseks või in vivo kasutamiseks.

Kude
Luuüdi
Sünonüümid
  • IM 9
  • IM9
  • GM04680

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Ümmargused rakud klastris
Rakutüüp
B lümfoblast

04Tunnused

Viide
IM-9 (Cytioni katalooginumber 302151)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1305

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
CD19+, CD20+, CD23+, CD27+, CD80+, CD83+, CD138+, MHC I+, MHC II+
Viirused
EBV+ vaba inimpatogeensetest viirustest SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% soojusinaktiveeritud FBS-iga
Kultuuri edasikasvatamine
Homogeniseerige kolvis olev rakususpensioon õrnalt pipeteerides üles-alla, seejärel võtke representatiivne proov, et määrata rakkude tihedus ml kohta. Lahjendage suspensiooni värske kultuurikeskkonnaga, et saavutada rakkude kontsentratsioon 1 x 105 rakku/ml, ja jaotage reguleeritud suspensioon uute kolvide vahel edasiseks kasvatamiseks.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Kiire
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Täpsustamata
Etniline kuuluvus
Kaukaasia