الانتقال إلى المحتوى
Vero E6
الأنسجة
الكلى الطبيعية

المستندات

Vero E6

Cell line · رقم المنتج 305008

Vero E6 cells, also known as Vero C1008 or Vero 76 clone E6, are a continuous line of epithelial cells derived from the kidney of the African green monkey...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

خلايا Vero E6، والمعروفة أيضًا باسم Vero C1008 أو Vero 76 clone E6، هي خط متصل من الخلايا الظهارية المشتقة من كلية القرد الأفريقي الأخضر، Chlorocebus sabaeus. يشتهر استنساخ Vero Clone E6، وهو سلالة فرعية من خلايا Vero، بشكل خاص لفائدته في أبحاث علم الفيروسات بسبب قابليته العالية لمجموعة واسعة من الفيروسات، بما في ذلك فيروسات كورونا مثل فيروس كورونا المستجد وفيروس سارس-كوف وفيروس سارس-كوف-2 وفيروس الإيبولا وفيروس زيكا.

ويُعدّ خط الخلايا مهمًا في إنتاج اللقاحات، مثل لقاح التهاب الدماغ الياباني، نظرًا لقدرتها على استنبات الفيروسات وعزلها. وقد لعبت الخلايا دورًا محوريًا في تطوير علاجات كوفيد-19، بما في ذلك اختبار مثبط البوليميراز ريمديسيفير. وبفضل قدرتها على دعم تكاثر مجموعة متنوعة من الفيروسات، تسهّل خلايا Vero E6 فحص المركبات وتقييم فعالية مضادات الفيروسات.

ويمتد دورها في التجارب السريرية ليشمل تقييم الأدوية المضادة للالتهابات مثل ديكساميثازون ودراسة المنتجات الجينية مثل بروتين P-glycoprotein (بروتين Pgp) الذي يشفره جين Pgp. تفتقر خلايا Vero E6 إلى جين الإنترفيرون-β، وهو ما يفسر جزئيًا قابليتها العالية للإصابة بالعدوى الفيروسية؛ ويمنعها هذا النقص من تكوين استجابة فطرية فعالة مضادة للفيروسات.

وباختصار، تُعد خلايا Vero E6 مورداً قيماً في مجال علم الفيروسات والطب الحيوي، حيث توفر منصة متعددة الاستخدامات لفحص مضادات الفيروسات، ودراسة التكاثر في فيرو، والمساعدة في السعي لفهم تسلسل الفيروسات القهقرية.

الأنسجة
الكلى الطبيعية

02التصنيف

كائن حي
القرد الأخضر الأفريقي
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارة
زمن المضاعفة
22 ساعة

04المعرّفات

المرجع
فيرو E6 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 305008)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
60711
سيلوصور
CVCL_0574

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
للبالغين