Mine otse sisu juurde
Vero E6
Kude
Normaalne neer

Dokumendid

Vero E6

Cell line · Toote number 305008

Vero E6 cells, also known as Vero C1008 or Vero 76 clone E6, are a continuous line of epithelial cells derived from the kidney of the African green monkey...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Vero E6 rakud, tuntud ka kui Vero C1008 või Vero 76 kloon E6, on Aafrika rohelise ahvi Chlorocebus sabaeus'e neerudest saadud pidev epiteelirakkude liin. Vero kloon E6, Vero rakkude alamliin, on eriti tuntud oma kasulikkuse poolest viroloogiauuringutes, kuna ta on väga tundlik paljude viiruste, sealhulgas koronaviiruste, nagu SARS-CoV ja SARS-CoV-2, Ebola viiruse ja Zika viiruse suhtes.

Rakuliin on oluline vaktsiinide, näiteks Jaapani entsefaliidi vaktsiini valmistamisel tänu nende võimele viiruste kasvatamiseks ja isoleerimiseks. Rakkudel on olnud keskne roll COVID-ravimite väljatöötamisel, sealhulgas polümeraasi inhibiitori remdesiviiri katsetamisel. Tänu oma võimele toetada erinevate viiruste replikatsiooni hõlbustavad Vero E6 rakud ühendite sõelumist ja viirusevastase tõhususe hindamist.

Nende roll kliinilistes uuringutes laieneb põletikuvastaste ravimite, nagu deksametasoon, hindamisele ja selliste geenitoodete nagu pgp-geeni poolt kodeeritava P-glükoproteiini (pgp-valk) uurimisele. Vero E6 rakkudel puudub interferoon-β geen, mis osaliselt seletab nende suurt vastuvõtlikkust viirusinfektsioonide suhtes; see puudus takistab neil tõhusa kaasasündinud viirusevastase vastuse tekkimist.

Kokkuvõttes on Vero E6 rakud väärtuslik ressurss viroloogia ja biomeditsiini valdkonnas, pakkudes mitmekülgset platvormi viirusevastase sõeluuringu läbiviimiseks, replikatsiooni uurimiseks Veros ja aidates kaasa retroviiruste järjestuse mõistmisele.

Kude
Normaalne neer

02Klassifikatsioon

Organism
Aafrika roheline ahv
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Kahekordistumisaeg
22 tundi

04Tunnused

Viide
Vero E6 (Cytioni katalooginumber 305008)
NCBI maksukood
60711
Cellosaurus
CVCL_0574

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
Täiskasvanud