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Vero E6
Gewebe
Normale Niere

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Vero E6

Cell line · Artikelnummer 305008

Vero E6 cells, also known as Vero C1008 or Vero 76 clone E6, are a continuous line of epithelial cells derived from the kidney of the African green monkey...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Vero E6-Zellen, auch bekannt als Vero C1008 oder Vero 76 Klon E6, sind eine kontinuierliche Linie von Epithelzellen, die aus der Niere des Afrikanischen Grünen Affen, Chlorocebus sabaeus, stammen. Der Vero-Klon E6, eine Sublinie der Vero-Zellen, ist vor allem für seine Nützlichkeit in der virologischen Forschung bekannt, da er sehr empfindlich gegenüber einer Vielzahl von Viren ist, darunter Coronaviren wie SARS-CoV und SARS-CoV-2, das Ebola-Virus und das Zika-Virus.

Die Zelllinie ist aufgrund ihrer Fähigkeit zur Viruskultur und -isolierung von entscheidender Bedeutung für die Herstellung von Impfstoffen, z. B. für den Impfstoff gegen Japanische Enzephalitis. Die Zellen haben eine zentrale Rolle bei der Entwicklung von COVID-Therapeutika gespielt, einschließlich der Prüfung des Polymerasehemmers Remdesivir. Mit ihrer Fähigkeit, die Replikation einer Vielzahl von Viren zu unterstützen, erleichtern Vero E6-Zellen das Screening von Substanzen und die Bewertung der antiviralen Wirksamkeit.

Ihre Rolle in klinischen Studien erstreckt sich auch auf die Bewertung von entzündungshemmenden Medikamenten wie Dexamethason und die Untersuchung von Genprodukten wie dem P-Glykoprotein (pgp-Protein), das vom pgp-Gen kodiert wird. Vero E6-Zellen fehlt das Interferon-β-Gen, was zum Teil ihre hohe Anfälligkeit für Virusinfektionen erklärt; dieser Mangel hindert sie daran, eine wirksame angeborene antivirale Reaktion zu entwickeln.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass Vero E6-Zellen eine wertvolle Ressource auf dem Gebiet der Virologie und Biomedizin sind, da sie eine vielseitige Plattform für das antivirale Screening, die Untersuchung der Replikation in Vero und die Suche nach dem Verständnis retroviraler Sequenzen bieten.

Gewebe
Normale Niere

02Klassifizierung

Organismus
Afrikanischer Grünaffe
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial
Verdopplungszeit
22 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
Vero E6 (Cytion Katalognummer 305008)
NCBI-Steuer-ID
60711
Cellosaurus
CVCL_0574

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
Erwachsener

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