Siirry sisältöön
Vero E6
Kudos
Normaali munuainen

Asiakirjat

Vero E6

Cell line · Tuotenumero 305008

Vero E6 cells, also known as Vero C1008 or Vero 76 clone E6, are a continuous line of epithelial cells derived from the kidney of the African green monkey...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Vero E6 -solut, jotka tunnetaan myös nimellä Vero C1008 tai Vero 76 klooni E6, ovat jatkuva epiteelisolulinja, joka on peräisin afrikkalaisen vihreän apinan, Chlorocebus sabaeus, munuaisista. Vero-klooni E6, Vero-solujen alalinja, tunnetaan erityisesti sen hyödyllisyydestä virologian tutkimuksessa, koska se on erittäin herkkä monille viruksille, kuten SARS-CoV:n ja SARS-CoV-2:n kaltaisille koronaviruksille, Ebola-virukselle ja Zika-virukselle.

Solulinja on ratkaisevan tärkeä rokotteiden, kuten japanin enkefaliittirokotteen, tuotannossa, koska se pystyy viljelemään ja eristämään viruksia. Soluilla on ollut keskeinen rooli COVID-terapeuttisten lääkkeiden kehittämisessä, muun muassa polymeraasinestäjä remdesivirin testaamisessa. Koska Vero E6 -solut kykenevät tukemaan erilaisten virusten replikaatiota, ne helpottavat yhdisteiden seulontaa ja viruslääkkeiden tehon arviointia.

Niiden rooli kliinisissä tutkimuksissa ulottuu myös deksametasonin kaltaisten tulehduskipulääkkeiden arviointiin ja pgp-geenin koodaaman P-glykoproteiinin (pgp-proteiini) kaltaisten geenituotteiden tutkimiseen. Vero E6 -soluista puuttuu interferoni-β-geeni, mikä osittain selittää niiden suuren alttiuden virusinfektioille; tämä puute estää niitä muodostamasta tehokasta synnynnäistä virusvasta-ainetta.

Yhteenvetona voidaan todeta, että Vero E6 -solut ovat arvokas resurssi virologian ja biolääketieteen alalla, sillä ne tarjoavat monipuolisen alustan viruslääkkeiden seulontaan, Verossa tapahtuvan replikaation tutkimiseen ja auttavat ymmärtämään retrovirusten sekvenssejä.

Kudos
Normaali munuainen

02Luokittelu

Organismi
afrikkalainen vihreä apina
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli
Kaksinkertaistumisaika
22 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
Vero E6 (Cytionin luettelonumero 305008)
NCBI-verotunnus
60711
Cellosaurus
CVCL_0574

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Aikuiset