Přejít na obsah
Vero E6
Tkáň
Normální ledvina

Dokumenty

Vero E6

Cell line · Číslo výrobku 305008

Vero E6 cells, also known as Vero C1008 or Vero 76 clone E6, are a continuous line of epithelial cells derived from the kidney of the African green monkey...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky Vero E6, známé také jako Vero C1008 nebo Vero 76 klon E6, jsou souvislou linií epiteliálních buněk odvozených z ledvin africké zelené opice Chlorocebus sabaeus. Klon Vero E6, podlinie buněk Vero, je obzvláště známý pro svou užitečnost ve virologickém výzkumu díky své vysoké citlivosti vůči široké škále virů, včetně koronavirů jako SARS-CoV a SARS-CoV-2, viru Ebola a viru Zika.

Buněčná linie má zásadní význam při výrobě vakcín, například vakcíny proti japonské encefalitidě, díky své schopnosti kultivovat a izolovat viry. Buňky hrály klíčovou roli při vývoji léčebných přípravků COVID, včetně testování inhibitoru polymerázy remdesiviru. Díky své schopnosti podporovat replikaci různých virů usnadňují buňky Vero E6 screening sloučenin a hodnocení antivirové účinnosti.

Jejich role v klinických studiích se rozšiřuje na hodnocení protizánětlivých léčiv, jako je dexametazon, a studium genových produktů, jako je protein P-glykoprotein (pgp) kódovaný genem pgp. Buňkám Vero E6 chybí gen pro interferon-β, což částečně vysvětluje jejich vysokou náchylnost k virovým infekcím; tento nedostatek jim brání v účinné vrozené protivirové odpovědi.

Lze shrnout, že buňky Vero E6 jsou cenným zdrojem v oblasti virologie a biomedicíny, neboť poskytují univerzální platformu pro antivirový screening, studium replikace ve Vero a napomáhají při hledání porozumění retrovirovým sekvencím.

Tkáň
Normální ledvina

02Klasifikace

Organismus
opice zelená africká
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové
Doba zdvojnásobení
22 hodin

04Identifikátory

Citace
Vero E6 (katalogové číslo Cytion 305008)
Daňové identifikační číslo NCBI
60711
Cellosaurus
CVCL_0574

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
Dospělí

Možná budete také potřebovat