Preskoči na vsebino
Vero E6
Tkivo
Normalna ledvica

Dokumenti

Vero E6

Cell line · Številka izdelka 305008

Vero E6 cells, also known as Vero C1008 or Vero 76 clone E6, are a continuous line of epithelial cells derived from the kidney of the African green monkey...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice Vero E6, znane tudi kot Vero C1008 ali Vero 76 klon E6, so neprekinjena linija epitelijskih celic, pridobljenih iz ledvic afriške zelene opice Chlorocebus sabaeus. Klon Vero E6, podlinija celic Vero, je zaradi svoje visoke občutljivosti na številne viruse, vključno s koronavirusi, kot sta SARS-CoV in SARS-CoV-2, virusom Ebola in virusom Zika, še posebej znan za uporabo v viroloških raziskavah.

Celična linija je zaradi sposobnosti gojenja in izolacije virusov ključnega pomena pri proizvodnji cepiv, kot so cepiva za cepivo proti japonskemu encefalitisu. Celice so imele ključno vlogo pri razvoju terapevtskih zdravil COVID, vključno s testiranjem zaviralca polimeraze remdesivir. Celice Vero E6 so sposobne podpirati razmnoževanje različnih virusov, zato olajšajo pregledovanje spojin in ocenjevanje protivirusne učinkovitosti.

Njihova vloga v kliničnih preskušanjih se razteza na ocenjevanje protivnetnih zdravil, kot je deksametazon, in preučevanje genskih produktov, kot je protein P-glikoprotein (pgp), ki ga kodira gen pgp. Celice Vero E6 nimajo gena za interferon-β, kar delno pojasnjuje njihovo visoko dovzetnost za virusne okužbe; ta pomanjkljivost jim onemogoča učinkovit prirojen protivirusni odziv.

Če povzamemo, so celice Vero E6 dragocen vir na področju virologije in biomedicine, saj zagotavljajo vsestransko platformo za protivirusno presejanje, preučevanje replikacije v Vero in pomagajo pri iskanju razumevanja retrovirusnih zaporedij.

Tkivo
Normalna ledvica

02Razvrstitev

Organizem
Afriška zelena opica
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski
Čas podvojitve
22 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
Vero E6 (kataloška številka Cytion 305008)
Davčna identifikacijska številka NCBI
60711
Cellosaurus
CVCL_0574

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
Odrasli