Mine otse sisu juurde
VERO
Kude
Neerud
Sünonüümid
Vero, VeroCCL81, Vero 81, Verda reno

Dokumendid

VERO

Cell line · Toote number 605372

VERO cells are widely used in developing vaccines, in the study of viral infections or malaria, and in tumor immunology and immunotherapy studies. VERO ce...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

VERO rakke kasutatakse laialdaselt vaktsiinide väljatöötamisel, viirusinfektsioonide või malaaria uurimisel ning kasvajate immunoloogia ja immunoteraapia uuringutes. VERO rakud saadi 1960. aastatel Jaapani Chiba ülikooli teadlaste rühma poolt Aafrika rohelise ahvi neerudest.

VERO-rakkude üks kriitilisi omadusi on nende kiire kasvukiirus, mille puhul populatsiooni kahekordistumise aeg on ligikaudu 24 tundi. See koos nende stabiilsuse ja kõrge viiruste tiitri tasemega teeb neist ideaalse valiku vaktsiini tootmiseks. Ühe silmapaistva näitena võib tuua, et Vero rakkudest saadud vaktsiini Jaapani entsefaliidi vastu kasutatakse laialdaselt ja see on litsentseeritud paljudes riikides kogu maailmas.

Vero rakud olid kesksel kohal paljude nakkushaiguste, sealhulgas punetiste, Ross Riveri viiruse, herpes simplex'i, leetrite ja polioviiruse vaktsiinide väljatöötamisel. Vero rakud on tuntud oma võime poolest toota, kasvatada ja säilitada viirusi optimeeritud kultuuritingimustes, mis teeb neist hindamatu ressursi viiruslike vaktsiinide tootmisel. Vero rakkude roll ulatub viirusvektorite genereerimiseni, mis on oluline nii vaktsiinide arendamiseks kui ka koetehnoloogiliste rakenduste jaoks, ning viiruste isoleerimiseni.

Erinevad VERO rakuliinid, nagu Vero 76 ja subkloon Vero E6, pakuvad unikaalseid omadusi, mis sobivad erinevatele uurimis- ja tootmisvajadustele. Vero 76 rakud on tuntud oma tugeva kasvu poolest ja neid kasutatakse laialdaselt vaktsiinide tootmisel tänu nende suurele viiruse saagikusele. Vero E6-l on seevastu spetsiifilised omadused, mis muudavad selle eriti kasulikuks teatavate viiruste uurimiseks, sealhulgas kõrgendatud tundlikkus Ebola- ja SARS-CoV-2 viiruse suhtes. Selle alamklooni ainulaadne suhtlemine viirustega muudab selle väärtuslikuks viiruspatogeneesi uuringutes ja viirusevastaste ravimite sõelumisel.

Kude
Neerud
Rakendused
Transfektsiooni peremees
Sünonüümid
  • Vero
  • VeroCCL81
  • Vero 81
  • Verda reno

02Klassifikatsioon

Organism
Aafrika roheline ahv
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
VERO (Cytioni katalooginumber 605372)
NCBI maksukood
60711
Cellosaurus
CVCL_0059

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Vaatamata sellele, et VERO rakuliin ei ole interferoonipuudulik, omab see interferoon-alfa/beta retseptorit, mis võimaldab neil reageerida normaalselt, kui nende kultuurikeskkonda lisatakse rekombinantset interferooni.
Mutatsiooniprofiil
Vero rakkudel on homosügootne 9-Mb deletsioon kromosoomil 12, mille tulemuseks on I tüüpi interferooni geenikompleksi ja tsükliinist sõltuvate kinaasi inhibiitorite CDKN2A ja CDKN2B kadumine.
Viirused
Verotoksiinide tuvastamine veiselihahakklihas
Viirusele vastuvõtlikkus
Polioviirus 1, 2, 3, Getah, Ndumu, Pixuna, Ross River, Semliki Forest, Paramaribo, Kokobera, Modoc, Murutucu, Germiston, Guaroa, Pongola, Tacaribe, SV-5, SV40, rubeola, rubellaviirus, reovirus 1, 2, 3, simian adenoviirused
Pöördtranskriptaas
Negatiivne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Täiskasvanud