Премини към съдържанието
EFM-19
Тъкан
Гърди
Заболяване
Дуктален карцином на гърдата
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
EFM19

Документи

EFM-19

Cell line · Номер на продукта 305540

EFM-19 е клетъчна линия от човешки рак на гърдата, положителна по отношение на естрогенните рецептори (ER+), която е била използвана за изследване на ефектите на естрогена и антиестрогените...

€420.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

EFM-19 е клетъчна линия на човешки рак на гърдата, положителна по отношение на естрогенния рецептор (ER+), която се използва за изследване на ефектите на естрогена и антиестрогените, като например тамоксифен, върху генната експресия. Тази клетъчна линия проявява силна реактивност към естрогенна стимулация, която модулира експресията на различни РНК, регулирани от естрогена. Забележително е, че клетките EFM-19 експресират по-високи нива на мРНК на естрогенния рецептор в сравнение с други клетъчни линии на рак на гърдата, като MCF-7.

Изследванията върху EFM-19 са подчертали уникалния ѝ профил на експресия на естроген-регулираните РНК. Например, е доказано, че РНК като pNR-1, pNR-2, pNR-25 и pNR-100 се индуцират от естрадиол. Тази индукция варира от умерена (3-кратна за pNR-100) до значителна (над 100-кратна за pNR-2). Интересно е, че реакцията на тези РНК към тамоксифен варира; докато тамоксифенът действа като частичен естрогенен агонист за някои РНК (например pNR-1), неговата ефективност е по-ниска за други (например pNR-2). По този начин тази клетъчна линия е ценна за изучаване на диференциалните ефекти на естрогена и антиестрогените върху генната регулация.

Клетките EFM-19 се отличават също така с приложението си в изследвания, проучващи по-широките роли на естрогена в биологията на рака на гърдата. Техните експресионни профили допринасят за разбирането на това как естрогенът и сигнализацията на естрогенните рецептори влияят върху туморогенезата и реакциите към лечението. Тази клетъчна линия, наред с други като MCF-7, помага за разкриването на механизмите, задвижвани от естрогена, като потенциално предоставя информация за терапевтични стратегии, включващи хормонални интервенции.

Тъкан
Гърди
Заболяване
Дуктален карцином на гърдата
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
  • EFM19

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител

04Идентификатори

Източник
EFM-19 (каталожен номер на Cytion: 305540)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0253

05Проява и предразположеност

Експресия на антигена
HER2+, ER++, AR++, PR++
Мутационен профил
Мутация: PIK3CA, p.His1047Leu (c.3140A>T), хомозиготна; Мутация: TP53, p.His193Arg (c.578A>G), хомозиготна

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 20% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
Разделяйте конфлуентната култура 2 пъти седмично.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
50 години