Zum Inhalt springen
EFM-19
Gewebe
Brust
Krankheit
Duktales Karzinom der Brust
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
EFM19

Dokumente

EFM-19

Cell line · Artikelnummer 305540

EFM-19 ist eine Östrogenrezeptor-positive (ER+) menschliche Brustkrebszelllinie, die zur Untersuchung der Wirkungen von Östrogen und Antiöstrogenen verwendet wurde...

€420.00zzgl. MwSt. und Versandkosten

Anpassung / Empfehlungen

Auf Lager
Charge
Empfohlen (frischeste Charge)
  • CoA
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung

EFM-19 ist eine Östrogenrezeptor-positive (ER+) menschliche Brustkrebszelllinie, die zur Untersuchung der Auswirkungen von Östrogen und Antiöstrogenen wie Tamoxifen auf die Genexpression verwendet wurde. Diese Zelllinie zeigt eine starke Reaktion auf Östrogenstimulation, wodurch die Expression verschiedener östrogenregulierter RNAs moduliert wird. Bemerkenswert ist, dass EFM-19-Zellen im Vergleich zu anderen Brustkrebszelllinien wie MCF-7 höhere Konzentrationen an Östrogenrezeptor-mRNA exprimieren.

Die Forschung an EFM-19 hat ihr einzigartiges Profil der Östrogen-regulierten RNA-Expression hervorgehoben. So wurde beispielsweise gezeigt, dass RNAs wie pNR-1, pNR-2, pNR-25 und pNR-100 durch Östradiol induziert werden. Diese Induktion reicht von moderat (3-fach bei pNR-100) bis erheblich (über 100-fach bei pNR-2). Interessanterweise variiert die Reaktion dieser RNAs auf Tamoxifen; während Tamoxifen bei einigen RNAs (z. B. pNR-1) als partieller Östrogenagonist wirkt, ist seine Wirksamkeit bei anderen (z. B. pNR-2) geringer. Diese Zelllinie ist daher wertvoll für die Untersuchung der unterschiedlichen Wirkungen von Östrogen und Antiöstrogenen auf die Genregulation.

EFM-19-Zellen sind zudem für ihre Anwendung in der Forschung zur Erforschung der umfassenderen Rolle von Östrogen in der Brustkrebsbiologie von Bedeutung. Ihre Expressionsprofile tragen zum Verständnis bei, wie Östrogen und die Östrogenrezeptor-Signalübertragung die Tumorentstehung und das Ansprechen auf Behandlungen beeinflussen. Diese Zelllinie trägt – zusammen mit anderen wie MCF-7 – dazu bei, östrogengesteuerte Mechanismen aufzuklären, was möglicherweise Aufschluss über therapeutische Strategien gibt, die hormonbasierte Interventionen beinhalten.

Gewebe
Brust
Krankheit
Duktales Karzinom der Brust
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
  • EFM19

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich

04Bezeichner

Quellenangabe
EFM-19 (Cytion-Katalognummer 305540)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0253

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
HER2+, ER++, AR++, PR++
Mutationsprofil
Mutation: PIK3CA, p.His1047Leu (c.3140A>T), homozygot; Mutation: TP53, p.His193Arg (c.578A>G), homozygot

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 20% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
Teilen Sie die konfluente Kultur zweimal pro Woche.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
50 Jahre