İçeriğe atla
EFM-19
Doku
Meme
Hastalık
Meme duktal karsinomu
Metastaz yeri
Plevral efüzyon
Eş anlamlılar
EFM19

EFM-19

Cell line · Ürün numarası 305540

EFM-19, östrojen ve antiöstrojenin etkilerini araştırmak amacıyla kullanılan, östrojen reseptörü pozitif (ER+) bir insan meme kanseri hücre hattıdır...

€420.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

EFM-19, östrojen ve tamoksifen gibi antiöstrojenlerin gen ekspresyonu üzerindeki etkilerini araştırmak için kullanılan, östrojen reseptörü pozitif (ER+) bir insan meme kanseri hücre hattıdır. Bu hücre hattı, östrojen stimülasyonuna güçlü bir tepki gösterir ve bu da çeşitli östrojen tarafından düzenlenen RNA’ların ekspresyonunu düzenler. Özellikle, EFM-19 hücreleri, MCF-7 gibi diğer meme kanseri hücre hatlarına kıyasla daha yüksek düzeyde östrojen reseptörü mRNA'sı eksprese eder.

EFM-19 üzerine yapılan araştırmalar, östrojen tarafından düzenlenen RNA ekspresyonunun benzersiz profilini ortaya koymuştur. Örneğin, pNR-1, pNR-2, pNR-25 ve pNR-100 gibi RNA'ların estradiol tarafından indüklendiği gösterilmiştir. Bu indüksiyon, orta düzeyde (pNR-100 için 3 kat) ile belirgin düzeyde (pNR-2 için 100 kattan fazla) arasında değişmektedir. İlginç bir şekilde, bu RNA'ların tamoksifene verdiği yanıt değişkenlik göstermektedir; tamoksifen bazı RNA'lar için (örn. pNR-1) kısmi bir östrojen agonisti olarak etki ederken, diğerleri için (örn. pNR-2) etkinliği daha düşüktür. Bu nedenle bu hücre hattı, östrojen ve antiöstrojenlerin gen regülasyonu üzerindeki farklı etkilerini incelemek açısından değerlidir.

EFM-19 hücreleri, meme kanseri biyolojisinde östrojenin daha geniş rollerini araştıran çalışmalardaki uygulamalarıyla da dikkat çekmektedir. Bu hücrelerin ekspresyon profilleri, östrojen ve östrojen reseptörü sinyal iletiminin tümör oluşumunu ve tedaviye yanıtı nasıl etkilediğinin anlaşılmasına katkıda bulunur. Bu hücre hattı, MCF-7 gibi diğer hücre hatlarıyla birlikte, östrojen kaynaklı mekanizmaların aydınlatılmasına yardımcı olur ve hormon temelli müdahaleleri içeren tedavi stratejilerine potansiyel olarak yön verebilir.

Doku
Meme
Hastalık
Meme duktal karsinomu
Metastaz yeri
Plevral efüzyon
Eş anlamlılar
  • EFM19

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
EFM-19 (Cytion katalog numarası 305540)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0253

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
HER2+, ER++, AR++, PR++
Mutasyon profili
Mutasyon: PIK3CA, p.His1047Leu (c.3140A>T), homozigot; Mutasyon: TP53, p.His193Arg (c.578A>G), homozigot

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %20 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
Birleşik kültürü haftada 2 kez bölün.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
50 yıl