Siirry sisältöön
EFM-19
Kudos
Rinta
Sairaus
Rinnan duktaalinen karsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
EFM19

Asiakirjat

EFM-19

Cell line · Tuotenumero 305540

EFM-19 on estrogeenireseptoripositiivinen (ER+) ihmisen rintasyöpäsolulinja, jota on käytetty estrogeenin ja antiestrogeenien vaikutusten tutkimiseen...

€420.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

EFM-19 on estrogeenireseptoripositiivinen (ER+) ihmisen rintasyöpäsolulinja, jota on käytetty tutkimaan estrogeenin ja antiestrogeenien, kuten tamoksifeenin, vaikutuksia geenien ilmentymiseen. Tämä solulinja reagoi voimakkaasti estrogeenistimulaatioon, joka säätelee erilaisten estrogeenin säätelemien RNA-molekyylien ilmentymistä. Erityisesti on huomattava, että EFM-19-soluissa ilmentyy enemmän estrogeenireseptorin mRNA:ta kuin muissa rintasyöpäsolulinjoissa, kuten MCF-7:ssä.

EFM-19:ää koskevassa tutkimuksessa on korostettu sen ainutlaatuista estrogeenin säätelemän RNA:n ilmentymisprofiilia. Esimerkiksi on osoitettu, että estradioli indusoi RNA:ita, kuten pNR-1, pNR-2, pNR-25 ja pNR-100. Tämä induktio vaihtelee kohtalaisesta (3-kertaiseksi pNR-100:n osalta) merkittävään (yli 100-kertaiseksi pNR-2:n osalta). Mielenkiintoista on, että näiden RNA:iden vaste tamoksifeenille vaihtelee; vaikka tamoksifeeni toimii osittaisena estrogeeniagonistina joillekin RNA:ille (esim. pNR-1), sen teho on heikompi toisille (esim. pNR-2). Tämä solulinja on siten arvokas tutkittaessa estrogeenin ja antiestrogeenien erilaisia vaikutuksia geenien säätelyyn.

EFM-19-solut ovat merkittäviä myös niiden soveltamisessa tutkimuksessa, jossa selvitetään estrogeenin laajempia rooleja rintasyövän biologiassa. Niiden ilmentymisprofiilit auttavat ymmärtämään, miten estrogeeni ja estrogeenireseptorin signalointi vaikuttavat kasvaimen syntyyn ja hoitovasteisiin. Tämä solulinja auttaa yhdessä muiden, kuten MCF-7:n, kanssa selvittämään estrogeenin ohjaamia mekanismeja, mikä voi tarjota tietoa hormonihoitoja sisältäville hoitostrategioille.

Kudos
Rinta
Sairaus
Rinnan duktaalinen karsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
  • EFM19

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen

04Tunnisteet

Lähdeviite
EFM-19 (Cytionin tuotenumero 305540)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0253

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
HER2+, ER++, AR++, PR++
Mutaatioprofiili
Mutaatio: PIK3CA, p.His1047Leu (c.3140A>T), homotsygoottinen; Mutaatio: TP53, p.His193Arg (c.578A>G), homotsygoottinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 20 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
Jaa yhtenäinen viljelmä kaksi kertaa viikossa.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
50 vuotta