Tartalomra ugrás
EFM-19
Szövet
Mell
Betegség
Emlőduktális karcinóma
Áttétes hely
Mellhártya folyadékgyülem
Szinonimák
EFM19

Dokumentumok

EFM-19

Cell line · Termékszám 305540

Az EFM-19 egy ösztrogénreceptor-pozitív (ER+) emberi emlőrák-sejtvonal, amelyet az ösztrogén és az antiösztrogének hatásainak vizsgálatára használtak…

€420.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az EFM-19 egy ösztrogénreceptor-pozitív (ER+) emberi emlőrák-sejtvonal, amelyet az ösztrogén és az antiösztrogének – például a tamoxifen – génkifejeződésre gyakorolt hatásainak vizsgálatára használnak. Ez a sejtvonal erőteljes reakciót mutat az ösztrogén-stimulációra, amely szabályozza a különböző ösztrogén által szabályozott RNS-ek kifejeződését. Érdemes megjegyezni, hogy az EFM-19 sejtek az ösztrogénreceptor mRNS-ét magasabb szinten fejezik ki, mint más emlőrák-sejtvonalak, például az MCF-7.

Az EFM-19-re irányuló kutatások rávilágítottak az ösztrogén által szabályozott RNS-expresszió egyedülálló profiljára. Például kimutatták, hogy az ösztradiol indukálja az olyan RNS-eket, mint a pNR-1, pNR-2, pNR-25 és pNR-100. Ez az indukció a mérsékelt (a pNR-100 esetében háromszoros) és a jelentős (a pNR-2 esetében több mint százszoros) mérték között mozog. Érdekes módon ezeknek az RNS-eknek a tamoxifenre adott válasza eltérő: míg a tamoxifen egyes RNS-ek (pl. a pNR-1) esetében részleges ösztrogén-agonistaként hat, másoknál (pl. a pNR-2) hatékonysága alacsonyabb. Ez a sejtvonal ezért értékes az ösztrogén és az antiösztrogének génszabályozásra gyakorolt eltérő hatásainak tanulmányozásához.

Az EFM-19 sejtek emellett az ösztrogén emlőrák-biológiában betöltött tágabb szerepét feltáró kutatásokban való alkalmazásuk miatt is figyelemre méltóak. Expressziós profiljuk hozzájárul annak megértéséhez, hogy az ösztrogén és az ösztrogénreceptor-jelátvitel hogyan befolyásolja a tumorogenezist és a kezelésre adott válaszokat. Ez a sejtvonal – más, például az MCF-7-hez hasonló sejtvonalak mellett – segít az ösztrogén által vezérelt mechanizmusok feltárásában, ami potenciálisan alapul szolgálhat a hormonalapú beavatkozásokat magukban foglaló terápiás stratégiák kidolgozásához.

Szövet
Mell
Betegség
Emlőduktális karcinóma
Áttétes hely
Mellhártya folyadékgyülem
Szinonimák
  • EFM19

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű

04Azonosítók

Hivatkozás
EFM-19 (Cytion katalógusszám: 305540)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0253

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
HER2-pozitív, ER-++, AR-++, PR-++
Mutációs profil
Mutáció: PIK3CA, p.His1047Leu (c.3140A>T), homozigóta; Mutáció: TP53, p.His193Arg (c.578A>G), homozigóta

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 20% FBS-szel egészítsük ki
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
A konfluens tenyészetet hetente kétszer osszuk szét.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
50 év