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EFM-19
Tecido
Peito
Doença
Carcinoma ductal da mama
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
EFM19

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EFM-19

Cell line · Número do produto 305540

A EFM-19 é uma linha celular de cancro da mama humano com recetores de estrogénio positivos (ER+) que tem sido utilizada para investigar os efeitos do estrogénio e dos antiestrogénios...

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01Informações gerais

Descrição

A EFM-19 é uma linha celular de cancro da mama humano positiva para o recetor de estrogénio (ER+) que tem sido utilizada para investigar os efeitos do estrogénio e dos antiestrogénios, como o tamoxifeno, na expressão génica. Esta linha celular demonstra uma resposta robusta à estimulação pelo estrogénio, o que modula a expressão de vários ARNs regulados pelo estrogénio. Notavelmente, as células EFM-19 expressam níveis mais elevados de ARNm do recetor de estrogénio em comparação com outras linhas celulares de cancro da mama, como a MCF-7.

A investigação sobre a EFM-19 destacou o seu perfil único de expressão de ARN regulado pelo estrogénio. Por exemplo, demonstrou-se que ARNs como o pNR-1, o pNR-2, o pNR-25 e o pNR-100 são induzidos pelo estradiol. Esta indução varia entre moderada (3 vezes para o pNR-100) e significativa (mais de 100 vezes para o pNR-2). Curiosamente, a resposta destes ARNs ao tamoxifeno varia; enquanto o tamoxifeno atua como um agonista parcial do estrogénio para alguns ARNs (por exemplo, o pNR-1), a sua eficácia é menor para outros (por exemplo, o pNR-2). Esta linha celular é, portanto, valiosa para o estudo dos efeitos diferenciais do estrogénio e dos antiestrogénios na regulação genética.

As células EFM-19 destacam-se também pela sua aplicação em investigação que explora os papéis mais amplos do estrogénio na biologia do cancro da mama. Os seus perfis de expressão contribuem para a compreensão de como o estrogénio e a sinalização do recetor de estrogénio influenciam a tumorigénese e as respostas ao tratamento. Esta linha celular, juntamente com outras como a MCF-7, ajuda a desvendar os mecanismos impulsionados pelo estrogénio, podendo servir de base a estratégias terapêuticas que incluam intervenções hormonais.

Tecido
Peito
Doença
Carcinoma ductal da mama
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
  • EFM19

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial

04Identificadores

Referência
EFM-19 (número de catálogo da Cytion 305540)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0253

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
HER2+, ER++, AR++, PR++
Perfil mutacional
Mutação: PIK3CA, p.His1047Leu (c.3140A>T), homozigótica; Mutação: TP53, p.His193Arg (c.578A>G), homozigótica

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 20% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
Divida a cultura confluente duas vezes por semana.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
50 anos