Přejít na obsah
EFM-19
Tkáň
Prsa
Nemoc
Duktální karcinom prsu
Místo metastázy
Pleurální výpotek
Synonyma
EFM19

Dokumenty

EFM-19

Cell line · Číslo výrobku 305540

EFM-19 je lidská buněčná linie rakoviny prsu s pozitivními estrogenovými receptory (ER+), která se používá ke zkoumání účinků estrogenu a antiestrogenů...

€420.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

EFM-19 je lidská buněčná linie rakoviny prsu s pozitivními estrogenovými receptory (ER+), která se používá ke zkoumání účinků estrogenu a antiestrogenů, jako je například tamoxifen, na genovou expresi. Tato buněčná linie vykazuje výraznou odezvu na stimulaci estrogenem, která moduluje expresi různých RNA regulovaných estrogenem. Je pozoruhodné, že buňky EFM-19 exprimují vyšší hladiny mRNA estrogenového receptoru ve srovnání s jinými buněčnými liniemi rakoviny prsu, jako je například MCF-7.

Výzkum EFM-19 zdůraznil její jedinečný profil exprese RNA regulované estrogenem. Bylo například prokázáno, že RNA, jako jsou pNR-1, pNR-2, pNR-25 a pNR-100, jsou indukovány estradiolem. Tato indukce se pohybuje od mírné (3násobná u pNR-100) až po výraznou (více než 100násobná u pNR-2). Zajímavé je, že reakce těchto RNA na tamoxifen se liší; zatímco tamoxifen působí jako částečný agonista estrogenu u některých RNA (např. pNR-1), u jiných (např. pNR-2) je jeho účinnost nižší. Tato buněčná linie je proto cenná pro studium rozdílných účinků estrogenu a antiestrogenů na regulaci genů.

Buňky EFM-19 jsou také významné pro své využití ve výzkumu zkoumajícím širší role estrogenu v biologii rakoviny prsu. Jejich expresní profily přispívají k pochopení toho, jak estrogen a signalizace estrogenových receptorů ovlivňují vznik nádorů a reakce na léčbu. Tato buněčná linie, spolu s dalšími, jako je MCF-7, pomáhá odhalovat mechanismy řízené estrogenem, což může přispět k tvorbě terapeutických strategií zahrnujících hormonální intervence.

Tkáň
Prsa
Nemoc
Duktální karcinom prsu
Místo metastázy
Pleurální výpotek
Synonyma
  • EFM19

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citace
EFM-19 (katalogové číslo Cytion 305540)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0253

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
HER2+, ER++, AR++, PR++
Mutační profil
Mutace: PIK3CA, p.His1047Leu (c.3140A>T), homozygotní; Mutace: TP53, p.His193Arg (c.578A>G), homozygotní

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 20 % FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
Rozdělte konfluentní kulturu dvakrát týdně.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
50 let