Mine otse sisu juurde
EFM-19
Kude
Rind
Haigus
Rinnanäärme duktaalne kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
EFM19

Dokumendid

EFM-19

Cell line · Toote number 305540

EFM-19 on östrogeeniretseptor-positiivne (ER+) inimese rinnavähi rakuliin, mida on kasutatud östrogeeni ja antiöstrogeeni mõju uurimiseks...

€420.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

EFM-19 on östrogeeniretseptor-positiivne (ER+) inimese rinnavähi rakuliin, mida on kasutatud östrogeeni ja antiöstrogeenide, näiteks tamoksifeeni, mõju uurimiseks geeniekspressioonile. See rakuliin reageerib tugevalt östrogeeni stimuleerimisele, mis mõjutab mitmesuguste östrogeenireguleeritud RNA-de ekspressiooni. Tähelepanuväärne on, et EFM-19 rakkudes ekspresseeritakse östrogeeniretseptori mRNA-d suuremas koguses võrreldes teiste rinnavähi rakuliinidega, nagu MCF-7.

EFM-19-ga seotud uuringud on toonud esile selle unikaalse östrogeenireguleeritud RNA ekspressiooni profiili. Näiteks on näidatud, et östradiool indutseerib selliste RNA-de ekspressiooni nagu pNR-1, pNR-2, pNR-25 ja pNR-100. See indutseerimine ulatub mõõdukast (pNR-100 puhul 3-kordne) kuni märkimisväärseni (pNR-2 puhul üle 100-kordne). Huvitaval kombel on nende RNA-de reaktsioon tamoksifeenile erinev; kuigi tamoksifeen toimib mõnede RNA-de (nt pNR-1) puhul osalise östrogeeni agonistina, on selle toime teiste puhul (nt pNR-2) väiksem. Seetõttu on see rakuliin väärtuslik östrogeeni ja antiöstrogeenide erinevate mõjude uurimiseks geeniregulatsioonile.

EFM-19 rakke tunnustatakse ka nende rakendamise poolest uuringutes, mis uurivad östrogeeni laiemat rolli rinnavähi bioloogias. Nende ekspressiooniprofiilid aitavad mõista, kuidas östrogeen ja östrogeeniretseptori signaalimine mõjutavad kasvajate teket ja ravivastust. See rakuliin, koos teistega nagu MCF-7, aitab lahti harutada östrogeenist tingitud mehhanisme, pakkudes potentsiaalselt teavet ravistrateegiatele, mis hõlmavad hormoonipõhiseid sekkumisi.

Kude
Rind
Haigus
Rinnanäärme duktaalne kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
  • EFM19

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
EFM-19 (Cytioni kataloognumber 305540)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0253

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
HER2+, ER++, AR++, PR++
Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: PIK3CA, p.His1047Leu (c.3140A>T), homosügootne; Mutatsioon: TP53, p.His193Arg (c.578A>G), homosügootne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada keskkonda 20% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
Jagage kokkuvoolavat kultuuri kaks korda nädalas.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
50 aastat