- Weefsel
- Borst
- Ziekte
- Borstductaal carcinoom
- Plaats van uitzaaiingen
- Pleurale effusie
- Synoniemen
- EFM19
Documenten
EFM-19
Cell line · Productnummer 305540
EFM-19 is een oestrogeenreceptor-positieve (ER+) menselijke borstkankercellijn die is gebruikt om de effecten van oestrogeen en anti-oestrogenen te onderzoeken...
Maatwerk / Aanbevelingen
- EFM-19Cell line€420.00
Aanbevolen (verste partij)
01Algemene informatie
- Beschrijving
EFM-19 is een oestrogeenreceptor-positieve (ER+) menselijke borstkankercellijn die is gebruikt om de effecten van oestrogeen en anti-oestrogenen, zoals tamoxifen, op de genexpressie te onderzoeken. Deze cellijn vertoont een sterke respons op oestrogeenstimulatie, die de expressie van diverse door oestrogeen gereguleerde RNA’s beïnvloedt. Opvallend is dat EFM-19-cellen hogere niveaus van oestrogeenreceptor-mRNA tot expressie brengen in vergelijking met andere borstkankercellijnen zoals MCF-7.
Onderzoek naar EFM-19 heeft het unieke profiel van de door oestrogeen gereguleerde RNA-expressie aan het licht gebracht. Zo is bijvoorbeeld aangetoond dat RNA’s zoals pNR-1, pNR-2, pNR-25 en pNR-100 door oestradiol worden geïnduceerd. Deze inductie varieert van matig (3-voudig voor pNR-100) tot aanzienlijk (meer dan 100-voudig voor pNR-2). Interessant is dat de reactie van deze RNA’s op tamoxifen varieert; terwijl tamoxifen voor sommige RNA’s (bijv. pNR-1) als een gedeeltelijke oestrogeenagonist werkt, is de werkzaamheid ervan voor andere (bijv. pNR-2) lager. Deze cellijn is daarom waardevol voor het bestuderen van de verschillende effecten van oestrogeen en anti-oestrogenen op genregulatie.
EFM-19-cellen vallen ook op door hun toepassing in onderzoek naar de bredere rol van oestrogeen in de biologie van borstkanker. Hun expressieprofielen dragen bij aan het inzicht in hoe oestrogeen en oestrogeenreceptorsignalering van invloed zijn op tumorontwikkeling en reacties op behandelingen. Deze cellijn helpt, samen met andere cellijnen zoals MCF-7, bij het ontrafelen van door oestrogeen aangestuurde mechanismen, wat mogelijk aanleiding geeft tot therapeutische strategieën die op hormonen gebaseerde interventies omvatten.
- Weefsel
- Borst
- Ziekte
- Borstductaal carcinoom
- Plaats van uitzaaiingen
- Pleurale effusie
- Synoniemen
- EFM19
02Classificatie
- Organisme
- Mens
- Seks
- Vrouw
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Kenmerken
- Morfologie
- Epitheelachtig
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- EFM-19 (Cytion-catalogusnummer 305540)
- NCBI-belastingnummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0253
05Expressie en vatbaarheid
- Antigeenexpressie
- HER2+, ER++, AR++, PR++
- Mutatieprofiel
- Mutatie: PIK3CA, p.His1047Leu (c.3140A>T), homozygoot; Mutatie: TP53, p.His193Arg (c.578A>G), homozygoot
06Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 20% FBS
- Dissociatiereagens
- Accutase
- Heruitplanten
- Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
- Vloeistofverversing
- Verdeel de confluente kweek twee keer per week.
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
08Donateur
- Leeftijd van de donor
- 50 jaar
09Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er is een overeenkomst inzake materiaaloverdracht vereist
- Ja