Ga naar de inhoud
EFM-19
Weefsel
Borst
Ziekte
Borstductaal carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
EFM19

Documenten

EFM-19

Cell line · Productnummer 305540

EFM-19 is een oestrogeenreceptor-positieve (ER+) menselijke borstkankercellijn die is gebruikt om de effecten van oestrogeen en anti-oestrogenen te onderzoeken...

€420.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

EFM-19 is een oestrogeenreceptor-positieve (ER+) menselijke borstkankercellijn die is gebruikt om de effecten van oestrogeen en anti-oestrogenen, zoals tamoxifen, op de genexpressie te onderzoeken. Deze cellijn vertoont een sterke respons op oestrogeenstimulatie, die de expressie van diverse door oestrogeen gereguleerde RNA’s beïnvloedt. Opvallend is dat EFM-19-cellen hogere niveaus van oestrogeenreceptor-mRNA tot expressie brengen in vergelijking met andere borstkankercellijnen zoals MCF-7.

Onderzoek naar EFM-19 heeft het unieke profiel van de door oestrogeen gereguleerde RNA-expressie aan het licht gebracht. Zo is bijvoorbeeld aangetoond dat RNA’s zoals pNR-1, pNR-2, pNR-25 en pNR-100 door oestradiol worden geïnduceerd. Deze inductie varieert van matig (3-voudig voor pNR-100) tot aanzienlijk (meer dan 100-voudig voor pNR-2). Interessant is dat de reactie van deze RNA’s op tamoxifen varieert; terwijl tamoxifen voor sommige RNA’s (bijv. pNR-1) als een gedeeltelijke oestrogeenagonist werkt, is de werkzaamheid ervan voor andere (bijv. pNR-2) lager. Deze cellijn is daarom waardevol voor het bestuderen van de verschillende effecten van oestrogeen en anti-oestrogenen op genregulatie.

EFM-19-cellen vallen ook op door hun toepassing in onderzoek naar de bredere rol van oestrogeen in de biologie van borstkanker. Hun expressieprofielen dragen bij aan het inzicht in hoe oestrogeen en oestrogeenreceptorsignalering van invloed zijn op tumorontwikkeling en reacties op behandelingen. Deze cellijn helpt, samen met andere cellijnen zoals MCF-7, bij het ontrafelen van door oestrogeen aangestuurde mechanismen, wat mogelijk aanleiding geeft tot therapeutische strategieën die op hormonen gebaseerde interventies omvatten.

Weefsel
Borst
Ziekte
Borstductaal carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
  • EFM19

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
EFM-19 (Cytion-catalogusnummer 305540)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0253

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
HER2+, ER++, AR++, PR++
Mutatieprofiel
Mutatie: PIK3CA, p.His1047Leu (c.3140A>T), homozygoot; Mutatie: TP53, p.His193Arg (c.578A>G), homozygoot

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 20% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
Verdeel de confluente kweek twee keer per week.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
50 jaar