Gå direkte til indholdet
EFM-19
Væv
Bryst
Sygdom
Duktalt karcinom i brystet
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
EFM19

Dokumenter

EFM-19

Cell line · Varenummer 305540

EFM-19 er en østrogenreceptor-positiv (ER+) human brystkræftcellelinje, der er blevet anvendt til at undersøge virkningerne af østrogen og antiøstrogen...

€420.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

EFM-19 er en østrogenreceptorpositiv (ER+) human brystkræftcellelinje, der er blevet anvendt til at undersøge virkningerne af østrogen og antiøstrogener, såsom tamoxifen, på genekspressionen. Denne cellelinje udviser en markant reaktion på østrogenstimulering, hvilket regulerer ekspressionen af forskellige østrogenregulerede RNA’er. Det er især værd at bemærke, at EFM-19-celler udtrykker højere niveauer af østrogenreceptor-mRNA sammenlignet med andre brystkræftcellelinjer som f.eks. MCF-7.

Forskning i EFM-19 har fremhævet dens unikke profil for østrogenreguleret RNA-ekspression. For eksempel har RNA'er såsom pNR-1, pNR-2, pNR-25 og pNR-100 vist sig at blive induceret af østradiol. Denne induktion spænder fra moderat (3-fold for pNR-100) til betydelig (over 100-fold for pNR-2). Interessant nok varierer disse RNA'ers reaktion på tamoxifen; mens tamoxifen fungerer som en delvis østrogenagonist for nogle RNA'er (f.eks. pNR-1), er dets virkning mindre for andre (f.eks. pNR-2). Denne cellelinje er derfor værdifuld til at undersøge de forskellige effekter af østrogen og antiøstrogener på genregulering.

EFM-19-celler er også bemærkelsesværdige for deres anvendelse i forskning, der udforsker østrogens bredere roller i brystkræftbiologien. Deres ekspressionsprofiler bidrager til forståelsen af, hvordan østrogen og østrogenreceptorsignalering påvirker tumorigenese og behandlingsrespons. Denne cellelinje bidrager sammen med andre, såsom MCF-7, til at afdække østrogendrevne mekanismer, hvilket potentielt kan danne grundlag for terapeutiske strategier, der omfatter hormonbaserede interventioner.

Væv
Bryst
Sygdom
Duktalt karcinom i brystet
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
  • EFM19

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
EFM-19 (Cytion-katalognummer 305540)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0253

05Udtryk og modtagelighed

Antigenudtryk
HER2+, ER++, AR++, PR++
Mutationsprofil
Mutation: PIK3CA, p.His1047Leu (c.3140A>T), homozygot; Mutation: TP53, p.His193Arg (c.578A>G), homozygot

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 20% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
Opdel den sammenvoksede kultur to gange om ugen.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
50 år