Pāriet uz saturu
EFM-19
Audums
Krūtis
Slimība
Krūts duktālā karcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
EFM19

Dokumenti

EFM-19

Cell line · Preces numurs 305540

EFM-19 ir estrogēnu receptoru pozitīva (ER+) cilvēka krūts vēža šūnu līnija, ko izmanto, lai pētītu estrogēnu un antiestrogēnu iedarbību...

€420.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

EFM-19 ir estrogēnu receptoru pozitīva (ER+) cilvēka krūts vēža šūnu līnija, ko izmanto, lai pētītu estrogēnu un antiestrogēnu, piemēram, tamoksifēna, ietekmi uz gēnu ekspresiju. Šī šūnu līnija parāda spēcīgu reakciju uz estrogēnu stimulāciju, kas modulē dažādu estrogēnu regulētu RNS ekspresiju. Jāatzīmē, ka EFM-19 šūnas ekspresē augstākus estrogēnu receptora mRNS līmeņus salīdzinājumā ar citām krūts vēža šūnu līnijām, piemēram, MCF-7.

Pētījumi par EFM-19 ir izcēluši tās unikālo estrogēnu regulētās RNS ekspresijas profilu. Piemēram, ir pierādīts, ka tādas RNS kā pNR-1, pNR-2, pNR-25 un pNR-100 inducē estradiols. Šī indukcija svārstās no mērenas (3 reizes pNR-100 gadījumā) līdz ievērojamai (vairāk nekā 100 reizes pNR-2 gadījumā). Interesanti, ka šo RNS reakcija uz tamoksifēnu ir atšķirīga; kamēr tamoksifēns dažām RNS (piem., pNR-1) darbojas kā daļējs estrogēna agonists, citām (piem., pNR-2) tā efektivitāte ir zemāka. Tādējādi šī šūnu līnija ir vērtīga, lai pētītu estrogēna un antiestrogēnu atšķirīgo ietekmi uz gēnu regulāciju.

EFM-19 šūnas ir ievērojamas arī ar to pielietojumu pētījumos, kuros tiek izpētīta estrogēna plašākā loma krūts vēža bioloģijā. To ekspresijas profili palīdz izprast, kā estrogēns un estrogēna receptoru signālu pārraide ietekmē audzēju veidošanos un reakciju uz ārstēšanu. Šī šūnu līnija, līdzīgi kā citas, piemēram, MCF-7, palīdz atklāt estrogēnu vadītos mehānismus, kas potenciāli var sniegt informāciju par terapeitiskām stratēģijām, kurās ietilpst uz hormoniem balstītas ārstēšanas metodes.

Audums
Krūtis
Slimība
Krūts duktālā karcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
  • EFM19

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs

04Identifikatori

Atsauce
EFM-19 (Cytion kataloga numurs 305540)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0253

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
HER2+, ER++, AR++, PR++
Mutāciju profils
Mutācija: PIK3CA, p.His1047Leu (c.3140A>T), homozigota; Mutācija: TP53, p.His193Arg (c.578A>G), homozigota

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 20% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
Sadaliet saplūstošo kultūru 2 reizes nedēļā.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
50 gadi