Премини към съдържанието
MV3
Тъкан
Кожа
Заболяване
Амеланотичен меланом
Място на метастазите
Лимфен възел
Синоними
MV-3, MV 3

Документи

MV3

Cell line · Номер на продукта 305495

Клетъчната линия MV3 е модел на човешки меланом, създаден от метастатичен лимфен възел на мъж с амеланотичен меланом. Тази клетъчна линия е силно ...

€550.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия MV3 е модел на човешки меланом, създаден от метастатичен лимфен възел на мъж с амеланотичен меланом. Тази клетъчна линия е силно метастатична и туморогенна, което я превръща в ключов ресурс за изследване на прогресията и метастазирането на меланома. Клетките MV3 проявяват значителни инвазивни свойства, подкрепени от тяхната силна способност да разграждат компонентите на екстрацелуларния матрикс. Тази способност се осъществява чрез пътя на плазминогенния активатор от урокиназен тип (u-PA) и неговата регулация от инхибиторите на плазминогенния активатор (PAI-1 и PAI-2). Клетките MV3 се характеризират с експресията на маркери, свързани с метастазирането, като интегрини (например VLA-2) и рецептори на растежни фактори, които са свързани с техния агресивен фенотип.

В модели с ксенографти MV3-клетките демонстрират бързо образуване на тумори и висока честота на спонтанни метастази, особено в белите дробове. Тези характеристики са били от ключово значение в предклиничните изследвания, насочени към разкриване на механизмите, лежащи в основата на разпространението на меланома и резистентността към терапията. Туморите от MV3 при голи мишки запазват хистологичните характеристики на оригиналния тумор, получен от пациент, включително висока митотична активност и ограничена пигментация. Прокоагулантните свойства на MV3 клетките допълнително допринасят за тяхното метастатично поведение, тъй като те проявяват активност на тъканния фактор и могат директно да активират протромбина до тромбин, засилвайки взаимодействията с туморната микросреда.

MV3 е използвана и в проучвания, фокусирани върху ролята на молекулите на клетъчната повърхност и тяхната регулация при метастазирането на меланома. Например, клетъчната линия експресира значителни нива на междуклетъчна адхезивна молекула-1 (ICAM-1) и рецептор на епидермалния растежен фактор (EGFR), които са свързани с повишен метастатичен потенциал. Моделът продължава да играе ключова роля в оценката на целевите терапии и в разбирането на молекулярните фактори, определящи злокачествения характер на меланомата.

Тъкан
Кожа
Заболяване
Амеланотичен меланом
Място на метастазите
Лимфен възел
Синоними
  • MV-3
  • MV 3

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител

04Идентификатори

Източник
MV3 (каталожен номер на Cytion 305495)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_W280

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
76 години
Етническа принадлежност
Неуточнено