Prejsť na obsah
MV3
Tkanivo
Koža
Choroba
Amelanotický melanóm
Miesto metastáz
Lymfatická uzlina
Synonymá
MV-3, MV 3

Dokumenty

MV3

Cell line · Číslo výrobku 305495

Bunková línia MV3 je model ľudského melanómu, ktorý bol vytvorený z metastázujúcej lymfatickej uzliny pacienta mužského pohlavia s amelanotickým melanómom. Táto bunková línia je vysoko ...

€550.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunka MV3 je model ľudského melanómu, ktorý bol vytvorený z metastázujúcej lymfatickej uzliny u mužského pacienta s amelanotickým melanómom. Táto bunková línia je vysoko metastázujúca a tumorigenická, čo z nej robí kľúčový zdroj pre štúdium progresie a metastázovania melanómu. Bunky MV3 vykazujú výrazné invazívne vlastnosti, ktoré sú podporené ich silnou schopnosťou degradovať zložky extracelulárnej matrice. Táto schopnosť je sprostredkovaná dráhou aktivátora plazminogénu typu urokinázy (u-PA) a jej reguláciou inhibítormi aktivátora plazminogénu (PAI-1 a PAI-2). Bunky MV3 sa vyznačujú expresiou markerov spojených s metastázovaním, ako sú integríny (napr. VLA-2) a receptory rastových faktorov, ktoré súvisia s ich agresívnym fenotypom.

V modeloch s xenotransplantátmi vykazujú bunky MV3 rýchlu tvorbu nádorov a vysokú frekvenciu spontánnych metastáz, najmä do pľúc. Tieto vlastnosti zohrávali kľúčovú úlohu v predklinickom výskume zameranom na objasnenie mechanizmov, ktoré sú základom šírenia melanómu a rezistencie voči liečbe. Nádory MV3 u nahých myší si zachovávajú histologické charakteristiky pôvodného nádoru odobratého pacientovi, vrátane vysokej mitotickej aktivity a obmedzenej pigmentácie. Prokoagulačné vlastnosti buniek MV3 ďalej prispievajú k ich metastatickému správaniu, keďže vykazujú aktivitu tkanivového faktora a môžu priamo aktivovať protrombín na trombín, čím posilňujú interakcie s mikroprostredím nádoru.

MV3 sa tiež využíva v štúdiách zameraných na úlohu molekúl na povrchu buniek a ich reguláciu pri metastázovaní melanómu. Napríklad táto bunková línia exprimuje významné hladiny molekuly medzibunkovej adhézie-1 (ICAM-1) a receptora epidermálneho rastového faktora (EGFR), ktoré sú spojené so zvýšeným metastatickým potenciálom. Tento model naďalej zohráva kľúčovú úlohu pri hodnotení cielených terapií a pri pochopení molekulárnych faktorov zodpovedných za malignitu melanómu.

Tkanivo
Koža
Choroba
Amelanotický melanóm
Miesto metastáz
Lymfatická uzlina
Synonymá
  • MV-3
  • MV 3

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citácia
MV3 (katalógové číslo Cytion 305495)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_W280

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
76 rokov
Etnická príslušnosť
Nešpecifikované