Siirry sisältöön
MV3
Kudos
Iho
Sairaus
Amelanoottinen melanooma
Metastaasikohde
Imusolmuke
Synonyymit
MV-3, MV 3

Asiakirjat

MV3

Cell line · Tuotenumero 305495

MV3-solulinja on ihmisen melanoomamalli, joka on peräisin amelanotista melanoomaa sairastavan miespotilaan metastaattisesta imusolmukkeesta. Tämä solulinja on erittäin ...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MV3-solulinja on ihmisen melanoomamalli, joka on peräisin amelanotisen melanooman sairastaneen miespotilaan metastaattisesta imusolmukkeesta. Tämä solulinja on erittäin metastaattinen ja tuumorigeeninen, minkä vuoksi se on keskeinen resurssi melanooman etenemisen ja etäpesäkkeiden tutkimuksessa. MV3-soluilla on merkittäviä invasiivisia ominaisuuksia, joita tukee niiden vahva kyky hajottaa solunulkoisen matriisin komponentteja. Tämä kyky välittyy urokinasi-tyyppisen plasminogeeniaktivaattorin (u-PA) reitin kautta ja sen säätelyn kautta plasminogeeniaktivaattorin estäjillä (PAI-1 ja PAI-2). MV3-soluille on ominaista metastaaseihin liittyvien merkkiaineiden, kuten integriinien (esim. VLA-2) ja kasvutekijän reseptorien, ilmentyminen, jotka liittyvät niiden aggressiiviseen fenotyyppiin.

Ksenotransplantaattimalleissa MV3-solut muodostavat nopeasti kasvaimia ja niillä esiintyy usein spontaaneja etäpesäkkeitä, erityisesti keuhkoihin. Nämä ominaisuudet ovat olleet keskeisiä prekliinisessä tutkimuksessa, jonka tavoitteena on selvittää melanooman leviämisen ja hoitoresistenssin taustalla olevia mekanismeja. Alastomissa hiirissä esiintyvät MV3-kasvaimet säilyttävät potilaalta peräisin olevan alkuperäisen kasvaimen histologiset piirteet, mukaan lukien korkean mitoositoiminnan ja rajoitetun pigmentaation. MV3-solujen hyytymistä edistävät ominaisuudet edistävät entisestään niiden metastaattista käyttäytymistä, sillä ne ilmentävät kudostekijän aktiivisuutta ja voivat aktivoida protrombiinin suoraan trombiiniksi, mikä tehostaa vuorovaikutusta kasvaimen mikroympäristön kanssa.

MV3-solulinjaa on käytetty myös tutkimuksissa, joissa on keskitytty solupintamolekyylien rooliin ja niiden säätelyyn melanooman etäpesäkkeiden muodostumisessa. Esimerkiksi solulinja ilmentää merkittäviä määriä solujen välistä adheesiomolekyyliä 1 (ICAM-1) ja epidermaalisia kasvutekijän reseptoreita (EGFR), jotka liittyvät lisääntyneeseen etäpesäkepotentiaaliin. Malli on edelleen keskeisessä asemassa kohdennettujen hoitojen arvioinnissa ja melanooman pahanlaatuisuuden molekyylitason tekijöiden ymmärtämisessä.

Kudos
Iho
Sairaus
Amelanoottinen melanooma
Metastaasikohde
Imusolmuke
Synonyymit
  • MV-3
  • MV 3

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen

04Tunnisteet

Lähdeviite
MV3 (Cytionin tuotenumero 305495)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_W280

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
76 vuotta
Etnisyys
Määrittelemätön