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MV3
Tecido
Pele
Doença
Melanoma amelanótico
Local da metástase
Nódulo linfático
Sinónimos
MV-3, MV 3

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MV3

Cell line · Número do produto 305495

A linha celular MV3 é um modelo de melanoma humano estabelecido a partir de um gânglio linfático metastático de um doente do sexo masculino com melanoma amelanótico. Esta linha celular é altamente...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular MV3 é um modelo de melanoma humano estabelecido a partir de um gânglio linfático metastático de um doente do sexo masculino com melanoma amelanótico. Esta linha celular é altamente metastática e tumorigénica, o que a torna um recurso fundamental para o estudo da progressão e da metástase do melanoma. As células MV3 apresentam propriedades invasivas significativas, apoiadas pela sua forte capacidade de degradar componentes da matriz extracelular. Esta capacidade é mediada pela via do ativador do plasminogéneo do tipo uroquinase (u-PA) e pela sua regulação por inibidores do ativador do plasminogéneo (PAI-1 e PAI-2). As células MV3 caracterizam-se pela expressão de marcadores associados à metástase, tais como integrinas (por exemplo, VLA-2) e recetores de fatores de crescimento, que estão associados ao seu fenótipo agressivo.

Em modelos de xenoenxertos, as células MV3 demonstram uma rápida formação de tumores e uma elevada frequência de metástases espontâneas, particularmente para os pulmões. Estas características têm sido fundamentais na investigação pré-clínica destinada a desvendar os mecanismos subjacentes à disseminação do melanoma e à resistência à terapia. Os tumores MV3 em ratos nude mantêm as características histológicas do tumor original derivado do doente, incluindo elevada atividade mitótica e pigmentação limitada. As propriedades pró-coagulantes das células MV3 contribuem ainda mais para o seu comportamento metastático, uma vez que exibem atividade do fator tecidular e podem ativar diretamente a protrombina em trombina, potenciando as interações com o microambiente tumoral.

A MV3 também tem sido utilizada em estudos centrados no papel das moléculas da superfície celular e na sua regulação na metástase do melanoma. Por exemplo, a linha celular expressa níveis significativos da molécula de adesão intercelular 1 (ICAM-1) e do recetor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), que estão associados a um potencial metastático aumentado. Este modelo continua a ser fundamental na avaliação de terapias direcionadas e na compreensão dos fatores moleculares responsáveis pela malignidade do melanoma.

Tecido
Pele
Doença
Melanoma amelanótico
Local da metástase
Nódulo linfático
Sinónimos
  • MV-3
  • MV 3

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial

04Identificadores

Referência
MV3 (número de catálogo da Cytion 305495)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_W280

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
76 anos
Etnia
Não especificado