Preskoči na vsebino
MV3
Tkivo
Koža
Bolezen
Amelanotični melanom
Mesto metastaze
Limfna vozlišča
Sinonimi
MV-3, MV 3

Dokumenti

MV3

Cell line · Številka izdelka 305495

Celična linija MV3 je model človeškega melanoma, vzpostavljen iz metastatskega limfnega vozla moškega bolnika z amelanotičnim melanomom. Ta celična linija je zelo ...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija MV3 je model človeškega melanoma, vzpostavljen iz metastatskega limfnega vozla moškega bolnika z amelanotičnim melanomom. Ta celična linija je izrazito metastatska in tumorigenična, kar jo uvršča med ključne vire za preučevanje napredovanja melanoma in metastaziranja. Celice MV3 kažejo izrazite invazivne lastnosti, ki jih podpira njihova močna sposobnost razgradnje komponent ekstracelularne matrice. To sposobnost posreduje pot aktivatorja plazminogena tipa urokinaze (u-PA) in njeno regulacijo z zaviralci aktivatorja plazminogena (PAI-1 in PAI-2). Celice MV3 so značilne po izražanju markerjev, povezanih z metastaziranjem, kot so integrini (npr. VLA-2) in receptorji rastnih faktorjev, ki so povezani z njihovim agresivnim fenotipom.

V modelih s ksenotransplantati celice MV3 kažejo hitro nastajanje tumorjev in visoko pogostost spontanih metastaz, zlasti v pljuča. Te lastnosti so bile ključne v predkliničnih raziskavah, namenjenih razjasnitvi mehanizmov, ki so podlaga za širjenje melanoma in odpornost na zdravljenje. Tumorji MV3 pri golih miših ohranjajo histološke značilnosti izvirnega tumorja, pridobljenega od pacienta, vključno z visoko mitotično aktivnostjo in omejeno pigmentacijo. Prokoagulantne lastnosti celic MV3 dodatno prispevajo k njihovemu metastaziranju, saj kažejo aktivnost tkivnega faktorja in lahko neposredno aktivirajo protrombin v trombin, s čimer okrepijo interakcije s tumorskim mikrookoljem.

MV3 se je uporabljala tudi v študijah, osredotočenih na vlogo molekul na celični površini in njihovo regulacijo pri metastaziranju melanoma. Na primer, ta celična linija izraža znatne ravni medcelične adhezijske molekule-1 (ICAM-1) in receptorja za epidermalni rastni faktor (EGFR), ki sta povezana s povečanim metastaznim potencialom. Model še naprej igra ključno vlogo pri ocenjevanju ciljnih terapij in razumevanju molekularnih dejavnikov malignosti melanoma.

Tkivo
Koža
Bolezen
Amelanotični melanom
Mesto metastaze
Limfna vozlišča
Sinonimi
  • MV-3
  • MV 3

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni

04Identifikatorji

Navajanje vira
MV3 (kataloška številka Cytion 305495)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_W280

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
76 let
Etnična pripadnost
Neopredeljeno