Pāriet uz saturu
MV3
Audums
Āda
Slimība
Amelanotiskā melanoma
Metastāžu vieta
Limfmezgls
Sinonīmi
MV-3, MV 3

Dokumenti

MV3

Cell line · Preces numurs 305495

MV3 šūnu līnija ir cilvēka melanomas modelis, kas izveidots no metastātiska limfmezgla, kas iegūts no vīrieša pacienta ar amelanotisko melanomu. Šī šūnu līnija ir ļoti ...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MV3 šūnu līnija ir cilvēka melanomas modelis, kas izveidots no metastātiska limfmezgla, kas iegūts no vīrieša pacienta ar amelanotisko melanomu. Šī šūnu līnija ir ļoti metastātiska un tumorogēna, tādēļ tā ir būtisks resurss melanomas progresēšanas un metastāžu izpētei. MV3 šūnām piemīt ievērojamas invazīvās īpašības, ko veicina to spēcīgā spēja noārdīt ekstracelulārās matricas komponentus. Šo spēju nodrošina urokināzes tipa plazminogēna aktivatora (u-PA) ceļš un tā regulēšana ar plazminogēna aktivatora inhibitoriem (PAI-1 un PAI-2). MV3 šūnas raksturo ar tām raksturīgo metastāzēm saistīto marķieru ekspresiju, piemēram, integrīnu (piem., VLA-2) un augšanas faktoru receptoru, kas ir saistīti ar to agresīvo fenotipu.

Ksenotransplantātu modeļos MV3 šūnas parāda strauju audzēja veidošanos un augstu spontāno metastāžu sastopamību, īpaši plaušās. Šīs īpašības ir bijušas izšķirošas pirmsklīniskajos pētījumos, kuru mērķis ir atklāt mehānismus, kas ir melanomas izplatīšanās un rezistences pret terapiju pamatā. MV3 audzēji kailpeles pelēm saglabā sākotnējā, no pacienta iegūtā audzēja histoloģiskās pazīmes, tostarp augstu mitotisko aktivitāti un ierobežotu pigmentāciju. MV3 šūnu prokoagulantu īpašības vēl vairāk veicina to metastātisko uzvedību, jo tām piemīt audu faktora aktivitāte un tās spēj tieši aktivēt protrombīnu, pārvēršot to trombīnā, tādējādi pastiprinot mijiedarbību ar audzēja mikrovidē.

MV3 ir izmantota arī pētījumos, kas vērsti uz šūnu virsmas molekulu lomu un to regulāciju melanomas metastāzē. Piemēram, šī šūnu līnija izsaka ievērojamus starpšūnu adhezijas molekulas-1 (ICAM-1) un epidermālā augšanas faktora receptora (EGFR) līmeņus, kas ir saistīti ar paaugstinātu metastātisko potenciālu. Šis modelis joprojām ir būtisks līdzeklis mērķtiecīgu terapiju novērtēšanā un melanomas ļaundabīguma molekulāro cēloņu izpratnē.

Audums
Āda
Slimība
Amelanotiskā melanoma
Metastāžu vieta
Limfmezgls
Sinonīmi
  • MV-3
  • MV 3

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs

04Identifikatori

Atsauce
MV3 (Cytion kataloga numurs 305495)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_W280

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
76 gadi
Etniskā piederība
Nav norādīts