Přejít na obsah
MV3
Tkáň
Kůže
Nemoc
Amelanotický melanom
Místo metastázy
Lymfatická uzlina
Synonyma
MV-3, MV 3

Dokumenty

MV3

Cell line · Číslo výrobku 305495

Buněčná linie MV3 je model lidského melanomu, který byl vytvořen z metastatické lymfatické uzliny pacienta mužského pohlaví s amelanotickým melanomem. Tato buněčná linie je vysoce ...

€550.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie MV3 je model lidského melanomu, který byl vytvořen z metastatické lymfatické uzliny mužského pacienta s amelanotickým melanomem. Tato buněčná linie vykazuje vysokou metastatickou a tumorigenní aktivitu, což z ní činí klíčový zdroj pro studium progrese a metastázování melanomu. Buňky MV3 vykazují významné invazivní vlastnosti, které jsou podpořeny jejich silnou schopností odbourávat složky extracelulární matrice. Tato schopnost je zprostředkována signální dráhou aktivátoru plazminogenu typu urokinázy (u-PA) a její regulací inhibitory aktivátoru plazminogenu (PAI-1 a PAI-2). Buňky MV3 se vyznačují expresí markerů spojených s metastázováním, jako jsou integriny (např. VLA-2) a receptory růstových faktorů, které souvisejí s jejich agresivním fenotypem.

V modelech s xenotransplantáty vykazují buňky MV3 rychlou tvorbu nádorů a vysokou frekvenci spontánních metastáz, zejména do plic. Tyto vlastnosti hrály klíčovou roli v předklinickém výzkumu zaměřeném na objasnění mechanismů, které jsou základem šíření melanomu a rezistence vůči léčbě. Nádory MV3 u nahých myší si zachovávají histologické rysy původního nádoru odvozeného od pacienta, včetně vysoké mitotické aktivity a omezené pigmentace. K metastatickému chování buněk MV3 dále přispívají jejich prokoagulační vlastnosti, neboť vykazují aktivitu tkáňového faktoru a mohou přímo aktivovat protrombin na trombin, čímž posilují interakce s mikroprostředím nádoru.

MV3 byla rovněž použita ve studiích zaměřených na roli molekul na buněčném povrchu a jejich regulaci při metastázování melanomu. Tato buněčná linie například exprimuje významné hladiny mezibuněčné adhezní molekuly-1 (ICAM-1) a receptoru epidermálního růstového faktoru (EGFR), které jsou spojeny se zvýšeným metastatickým potenciálem. Tento model i nadále hraje klíčovou roli při hodnocení cílených terapií a porozumění molekulárním faktorům malignity melanomu.

Tkáň
Kůže
Nemoc
Amelanotický melanom
Místo metastázy
Lymfatická uzlina
Synonyma
  • MV-3
  • MV 3

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citace
MV3 (katalogové číslo Cytion 305495)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_W280

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
76 let
Etnická příslušnost
Nespecifikováno