Gå til innholdet
MV3
Vev
Hud
Sykdom
Amelanotisk melanom
Metastaseområde
Lymfeknute
Synonymer
MV-3, MV 3

Dokumenter

MV3

Cell line · Produktnummer 305495

MV3-cellelinjen er en modell for humant melanom som er etablert fra en metastatisk lymfeknute hos en mannlig pasient med amelanotisk melanom. Denne cellelinjen er svært ...

€550.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

MV3-cellelinjen er en modell for humant melanom som er etablert fra en metastatisk lymfeknute hos en mannlig pasient med amelanotisk melanom. Denne cellelinjen er svært metastatisk og tumorigen, noe som gjør den til en viktig ressurs for å studere melanomets progresjon og metastasering. MV3-celler viser betydelige invasive egenskaper, understøttet av deres sterke evne til å nedbryte komponenter i den ekstracellulære matriksen. Denne evnen formidles gjennom urokinase-type plasminogenaktivator (u-PA)-signalveien og dens regulering av plasminogenaktivatorinhibitorer (PAI-1 og PAI-2). MV3-celler kjennetegnes ved uttrykk av markører assosiert med metastasering, slik som integriner (f.eks. VLA-2) og vekstfaktorreseptorer, som er knyttet til deres aggressive fenotype.

I xenotransplantasjonsmodeller viser MV3-celler rask tumordannelse og en høy forekomst av spontane metastaser, særlig til lungene. Disse egenskapene har vært sentrale i preklinisk forskning med sikte på å avdekke mekanismene som ligger til grunn for spredning av melanom og resistens mot behandling. MV3-svulster hos nakne mus beholder de histologiske trekkene til den opprinnelige svulsten fra pasienten, inkludert høy mitotisk aktivitet og begrenset pigmentering. De prokoagulerende egenskapene til MV3-cellene bidrar ytterligere til deres metastatiske atferd, da de viser vevsfaktoraktivitet og kan aktivere protrombin direkte til trombin, noe som forsterker interaksjonene med svulstens mikromiljø.

MV3 har også blitt brukt i studier som har fokusert på rollen til molekyler på celleoverflaten og reguleringen av disse i melanommetastaser. For eksempel uttrykker cellelinjen betydelige nivåer av intercellulært adhesjonsmolekyl-1 (ICAM-1) og epidermal vekstfaktorreseptor (EGFR), som er forbundet med økt metastatisk potensial. Modellen spiller fortsatt en avgjørende rolle i evalueringen av målrettede behandlinger og forståelsen av de molekylære driverne bak melanomets ondartethet.

Vev
Hud
Sykdom
Amelanotisk melanom
Metastaseområde
Lymfeknute
Synonymer
  • MV-3
  • MV 3

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
MV3 (Cytion-katalognummer 305495)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_W280

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
76 år
Etnisitet
Uspesifisert