Przejdź do treści
MV3
Chusteczka
Skóra
Choroba
Czerniak amelanotyczny
Miejsce przerzutów
Węzeł chłonny
Synonimy
MV-3, MV 3

Dokumenty

MV3

Cell line · Numer produktu 305495

Linia komórkowa MV3 stanowi model ludzkiego czerniaka, wyhodowany z przerzutowego węzła chłonnego pacjenta płci męskiej cierpiącego na czerniaka bezpigmentowego. Linia ta charakteryzuje się wysokim stopniem...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa MV3 stanowi model ludzkiego czerniaka, wyhodowany z przerzuconego węzła chłonnego pacjenta płci męskiej z czerniakiem bezpigmentowym. Linia ta charakteryzuje się wysoką zdolnością do tworzenia przerzutów i wywoływania nowotworów, co czyni ją kluczowym zasobem do badania progresji czerniaka i powstawania przerzutów. Komórki MV3 wykazują znaczne właściwości inwazyjne, poparte ich silną zdolnością do degradacji składników macierzy pozakomórkowej. Zdolność ta jest regulowana przez szlak aktywatora plazminogenu typu urokinazy (u-PA) oraz jego regulację przez inhibitory aktywatora plazminogenu (PAI-1 i PAI-2). Komórki MV3 charakteryzują się ekspresją markerów związanych z przerzutami, takich jak integryny (np. VLA-2) i receptory czynników wzrostu, które są powiązane z ich agresywnym fenotypem.

W modelach przeszczepów heterogenicznych komórki MV3 wykazują szybkie tworzenie nowotworów i wysoką częstotliwość spontanicznych przerzutów, szczególnie do płuc. Cechy te odegrały kluczową rolę w badaniach przedklinicznych mających na celu wyjaśnienie mechanizmów leżących u podstaw rozprzestrzeniania się czerniaka i oporności na leczenie. Guzy MV3 u myszy nagich zachowują cechy histologiczne pierwotnego guza pochodzącego od pacjenta, w tym wysoką aktywność mitotyczną i ograniczoną pigmentację. Właściwości prokoagulacyjne komórek MV3 dodatkowo przyczyniają się do ich zachowań przerzutowych, ponieważ wykazują one aktywność czynnika tkankowego i mogą bezpośrednio aktywować protrombinę do trombiny, wzmacniając interakcje z mikrośrodowiskiem nowotworowym.

Linia komórkowa MV3 została również wykorzystana w badaniach skupiających się na roli cząsteczek powierzchniowych komórek i ich regulacji w procesie przerzutów czerniaka. Na przykład linia ta wykazuje znaczne poziomy ekspresji cząsteczki adhezyjnej międzykomórkowej 1 (ICAM-1) oraz receptora naskórkowego czynnika wzrostu (EGFR), które są związane ze zwiększonym potencjałem przerzutowym. Model ten nadal odgrywa kluczową rolę w ocenie terapii celowanych oraz zrozumieniu molekularnych czynników odpowiedzialnych za złośliwość czerniaka.

Chusteczka
Skóra
Choroba
Czerniak amelanotyczny
Miejsce przerzutów
Węzeł chłonny
Synonimy
  • MV-3
  • MV 3

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka

04Identyfikatory

Źródło
MV3 (numer katalogowy Cytion 305495)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_W280

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
76 lat
Pochodzenie etniczne
Nieokreślony