- Chusteczka
- Skóra
- Choroba
- Czerniak amelanotyczny
- Miejsce przerzutów
- Węzeł chłonny
- Synonimy
- MV-3, MV 3
Dokumenty
MV3
Cell line · Numer produktu 305495
Linia komórkowa MV3 stanowi model ludzkiego czerniaka, wyhodowany z przerzutowego węzła chłonnego pacjenta płci męskiej cierpiącego na czerniaka bezpigmentowego. Linia ta charakteryzuje się wysokim stopniem...
Dostosowanie / Zalecenia
- MV3Cell line€550.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
Linia komórkowa MV3 stanowi model ludzkiego czerniaka, wyhodowany z przerzuconego węzła chłonnego pacjenta płci męskiej z czerniakiem bezpigmentowym. Linia ta charakteryzuje się wysoką zdolnością do tworzenia przerzutów i wywoływania nowotworów, co czyni ją kluczowym zasobem do badania progresji czerniaka i powstawania przerzutów. Komórki MV3 wykazują znaczne właściwości inwazyjne, poparte ich silną zdolnością do degradacji składników macierzy pozakomórkowej. Zdolność ta jest regulowana przez szlak aktywatora plazminogenu typu urokinazy (u-PA) oraz jego regulację przez inhibitory aktywatora plazminogenu (PAI-1 i PAI-2). Komórki MV3 charakteryzują się ekspresją markerów związanych z przerzutami, takich jak integryny (np. VLA-2) i receptory czynników wzrostu, które są powiązane z ich agresywnym fenotypem.
W modelach przeszczepów heterogenicznych komórki MV3 wykazują szybkie tworzenie nowotworów i wysoką częstotliwość spontanicznych przerzutów, szczególnie do płuc. Cechy te odegrały kluczową rolę w badaniach przedklinicznych mających na celu wyjaśnienie mechanizmów leżących u podstaw rozprzestrzeniania się czerniaka i oporności na leczenie. Guzy MV3 u myszy nagich zachowują cechy histologiczne pierwotnego guza pochodzącego od pacjenta, w tym wysoką aktywność mitotyczną i ograniczoną pigmentację. Właściwości prokoagulacyjne komórek MV3 dodatkowo przyczyniają się do ich zachowań przerzutowych, ponieważ wykazują one aktywność czynnika tkankowego i mogą bezpośrednio aktywować protrombinę do trombiny, wzmacniając interakcje z mikrośrodowiskiem nowotworowym.
Linia komórkowa MV3 została również wykorzystana w badaniach skupiających się na roli cząsteczek powierzchniowych komórek i ich regulacji w procesie przerzutów czerniaka. Na przykład linia ta wykazuje znaczne poziomy ekspresji cząsteczki adhezyjnej międzykomórkowej 1 (ICAM-1) oraz receptora naskórkowego czynnika wzrostu (EGFR), które są związane ze zwiększonym potencjałem przerzutowym. Model ten nadal odgrywa kluczową rolę w ocenie terapii celowanych oraz zrozumieniu molekularnych czynników odpowiedzialnych za złośliwość czerniaka.
- Chusteczka
- Skóra
- Choroba
- Czerniak amelanotyczny
- Miejsce przerzutów
- Węzeł chłonny
- Synonimy
- MV-3
- MV 3
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Mężczyzna
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobny do nabłonka
04Identyfikatory
- Źródło
- MV3 (numer katalogowy Cytion 305495)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_W280
05Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
07Darczyńca
- Wiek dawcy
- 76 lat
- Pochodzenie etniczne
- Nieokreślony
08Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak