Премини към съдържанието
HCC70
Тъкан
Млечна жлеза
Заболяване
Дуктален карцином на гърдата
Синоними
HCC-70, HCC 70, HCC0070, Hamon Cancer Center 70

Документи

HCC70

Cell line · Номер на продукта 305464

The HCC70 cell line is derived from a triple-negative breast cancer (TNBC), a subtype that lacks expression of estrogen, progesterone, and HER2 receptors,...

€550.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия HCC70 е получена от тройно негативен рак на гърдата (TNBC) - подтип, при който липсва експресия на естрогенни, прогестеронови и HER2 рецептори, което затруднява лечението му поради ограничените целеви терапии. Клетките на HCC70 се отличават с класификацията си като базално-подобни 1 (BL1) в рамките на подтиповете на TNBC, което оказва влияние върху отговора им към химиотерапия и стратегии за лечение. Важно е да се отбележи, че клетките HCC70 експресират естрогенния рецептор GPR30, свързан с G-протеин, в значителни количества. GPR30 се свързва с бързи сигнални реакции към естрогени като 17β-естрадиол, като влияе върху клетъчната пролиферация и други онкогенни пътища.

Ключова генетична характеристика на HCC70 е наличието на мутация на TP53, по-конкретно на варианта R248Q. Тази мутация се свързва с фенотипи на придобиване на функция (GOF), които допринасят за оцеляването на раковите клетки и агресивното им поведение. При проучвания мутацията R248Q в клетките на HCC70 е свързана с повишена деформативност на клетките и променена локализация на PARP1, което предполага потенциална чувствителност към инхибитори на PARP.

Изследванията на лекарствените реакции при HCC70 и подобни клетъчни линии на TNBC подчертават ефикасността на протеазомните инхибитори и терапиите на основата на платина. Тези лечения са обещаващи, като лекарства като бортезомиб демонстрират цитотоксичен ефект. Взаимодействието между химиотерапевтичната резистентност и специфичната рецепторна сигнализация, като например тази, която се медиира от GPR30, подчертава сложността на насочването към подтипове TNBC, като тези, моделирани от HCC70.

Тъкан
Млечна жлеза
Заболяване
Дуктален карцином на гърдата
Синоними
  • HCC-70
  • HCC 70
  • HCC0070
  • Hamon Cancer Center 70

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Епителна клетка

04Идентификатори

Източник
HCC70 (каталожен номер 305464 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1270

05Проява и предразположеност

Експресия на протеини
Епителен гликопротеин 2 (EGP2), цитокератин 19
Онкогени
Her2/neu-, p53+ (свръхекспресиран)

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
49 години
Етническа принадлежност
Афроамериканец