Vai al contenuto
HCC70
Tessuto
Ghiandola mammaria
Malattia
Carcinoma duttale della mammella
Sinonimi
HCC-70, HCC 70, HCC0070, Hamon Cancer Center 70

Documenti

HCC70

Cell line · Codice prodotto 305464

The HCC70 cell line is derived from a triple-negative breast cancer (TNBC), a subtype that lacks expression of estrogen, progesterone, and HER2 receptors,...

€550.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
Lotto
Consigliati (partita più recente)
  • CoA
1

01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare HCC70 deriva da un carcinoma mammario triplo negativo (TNBC), un sottotipo che manca dell'espressione dei recettori degli estrogeni, del progesterone e dell'HER2, rendendo difficile il trattamento a causa delle limitate terapie mirate. Le cellule HCC70 si distinguono per la loro classificazione basal-like 1 (BL1) all'interno dei sottotipi TNBC, che influisce sulla loro risposta alla chemioterapia e alle strategie di trattamento. È importante notare che le cellule HCC70 esprimono il recettore degli estrogeni accoppiato a proteine G GPR30 a livelli significativi. Il GPR30 è stato associato a rapide risposte di segnalazione agli estrogeni come il 17β-estradiolo, influenzando la proliferazione cellulare e altre vie oncogeniche.

Una caratteristica genetica chiave dell'HCC70 è la presenza di una mutazione TP53, in particolare la variante R248Q. Questa mutazione è associata a fenotipi di guadagno di funzione (GOF) che contribuiscono alla sopravvivenza delle cellule tumorali e al loro comportamento aggressivo. Negli studi, la mutazione R248Q nelle cellule HCC70 è stata collegata a una maggiore deformabilità cellulare e a un'alterata localizzazione di PARP1, che implica una potenziale sensibilità agli inibitori di PARP.

La ricerca sulla risposta ai farmaci nelle linee cellulari HCC70 e TNBC simili ha evidenziato l'efficacia degli inibitori del proteasoma e delle terapie a base di platino. Questi trattamenti si sono rivelati promettenti, con farmaci come il bortezomib che hanno dimostrato effetti citotossici. L'interazione tra la resistenza ai chemioterapici e la segnalazione di recettori specifici, come quello mediato da GPR30, sottolinea la complessità di colpire sottotipi di TNBC come quelli modellati da HCC70.

Tessuto
Ghiandola mammaria
Malattia
Carcinoma duttale della mammella
Sinonimi
  • HCC-70
  • HCC 70
  • HCC0070
  • Hamon Cancer Center 70

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tipo di cellula
Cellula epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
HCC70 (numero di catalogo Cytion 305464)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1270

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Glicoproteina epiteliale 2 (EGP2), citocheratina 19
Oncogeni
Her2/neu-, p53+ (sovraespresso)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
49 anni
Etnia
Afroamericano