Przejdź do treści
HCC70
Chusteczka
Gruczoł sutkowy
Choroba
Rak przewodowy piersi
Synonimy
HCC-70, HCC 70, HCC0070, Hamon Cancer Center 70

Dokumenty

HCC70

Cell line · Numer produktu 305464

The HCC70 cell line is derived from a triple-negative breast cancer (TNBC), a subtype that lacks expression of estrogen, progesterone, and HER2 receptors,...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa HCC70 pochodzi z potrójnie ujemnego raka piersi (TNBC), podtypu, który nie wykazuje ekspresji receptorów estrogenowych, progesteronowych i HER2, co utrudnia leczenie ze względu na ograniczone terapie celowane. Komórki HCC70 wyróżniają się klasyfikacją podstawno-podobną 1 (BL1) w ramach podtypów TNBC, co wpływa na ich odpowiedź na chemioterapię i strategie leczenia. Co ważne, komórki HCC70 wykazują znaczną ekspresję receptora estrogenowego GPR30 sprzężonego z białkiem G. GPR30 został powiązany z szybką odpowiedzią sygnalizacyjną na estrogeny, takie jak 17β-estradiol, wpływając na proliferację komórek i inne szlaki onkogenne.

Kluczową cechą genetyczną HCC70 jest obecność mutacji TP53, w szczególności wariantu R248Q. Mutacja ta jest związana z fenotypami zysku funkcji (GOF), które przyczyniają się do przeżycia komórek nowotworowych i agresywnego zachowania. W badaniach mutacja R248Q w komórkach HCC70 została powiązana ze zwiększoną odkształcalnością komórek i zmienioną lokalizacją PARP1, co sugeruje potencjalną wrażliwość na inhibitory PARP.

Badania nad odpowiedzią na leki w HCC70 i podobnych liniach komórkowych TNBC wykazały skuteczność inhibitorów proteasomu i terapii opartych na platynie. Terapie te okazały się obiecujące, a leki takie jak bortezomib wykazują działanie cytotoksyczne. Wzajemne oddziaływanie między opornością na chemioterapię a specyficzną sygnalizacją receptorową, taką jak ta, w której pośredniczy GPR30, podkreśla złożoność celowania w podtypy TNBC, takie jak te modelowane przez HCC70.

Chusteczka
Gruczoł sutkowy
Choroba
Rak przewodowy piersi
Synonimy
  • HCC-70
  • HCC 70
  • HCC0070
  • Hamon Cancer Center 70

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Typ komórki
Komórka nabłonkowa

04Identyfikatory

Źródło
HCC70 (numer katalogowy Cytion 305464)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1270

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
Glikoproteina nabłonkowa 2 (EGP2), cytokeratyna 19
Onkogeny
Her2/neu-, p53+ (z nadekspresją)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
49 lat
Pochodzenie etniczne
Afroamerykanin