Siirry sisältöön
HCC70
Kudos
Rintarauhanen
Sairaus
Rinnan duktaalinen karsinooma
Synonyymit
HCC-70, HCC 70, HCC0070, Hamon Cancer Center 70

Asiakirjat

HCC70

Cell line · Tuotenumero 305464

The HCC70 cell line is derived from a triple-negative breast cancer (TNBC), a subtype that lacks expression of estrogen, progesterone, and HER2 receptors,...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HCC70-solulinja on peräisin kolmoisnegatiivisesta rintasyövästä (TNBC), joka on alatyyppi, josta puuttuu estrogeeni-, progesteroni- ja HER2-reseptoreiden ilmentyminen, mikä tekee siitä vaikeasti hoidettavan, koska kohdennettuja hoitoja on rajoitetusti. HCC70-solujen erityispiirteenä on niiden basal-like 1 (BL1) -luokitus TNBC-alatyypeissä, mikä vaikuttaa niiden vasteeseen kemoterapialle ja hoitostrategioille. Tärkeää on, että HCC70-solut ilmentävät G-proteiinikytkentäistä estrogeenireseptoria GPR30:tä merkittävissä määrin. GPR30 on yhdistetty nopeisiin signaalivasteisiin estrogeeneille, kuten 17β-estradioylle, ja se vaikuttaa solujen proliferaatioon ja muihin onkogeenisiin reitteihin.

HCC70:n keskeinen geneettinen ominaisuus on TP53-mutaatio, erityisesti R248Q-muunnos. Tämä mutaatio liittyy GOF-fenotyyppeihin (gain-of-function), jotka edistävät syöpäsolujen selviytymistä ja aggressiivista käyttäytymistä. Tutkimuksissa HCC70-solujen R248Q-mutaatio on yhdistetty solujen lisääntyneeseen epämuodostuvuuteen ja muuttuneeseen PARP1:n lokalisaatioon, mikä viittaa mahdolliseen herkkyyteen PARP:n estäjille.

HCC70:n ja vastaavien TNBC-solulinjojen lääkevasteiden tutkimuksessa on korostettu proteasomin estäjien ja platinapohjaisten hoitojen tehoa. Nämä hoidot ovat osoittautuneet lupaaviksi, ja bortetsomibin kaltaisilla lääkkeillä on ollut sytotoksisia vaikutuksia. Kemoterapeuttisen resistenssin ja reseptorisignaalien, kuten GPR30:n välittämän reseptorisignaalin, välinen vuorovaikutus korostaa HCC70:n kaltaisten TNBC-alatyyppien kohdentamisen monimutkaisuutta.

Kudos
Rintarauhanen
Sairaus
Rinnan duktaalinen karsinooma
Synonyymit
  • HCC-70
  • HCC 70
  • HCC0070
  • Hamon Cancer Center 70

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epiteelisolu

04Tunnisteet

Lähdeviite
HCC70 (Cytionin luettelonumero 305464)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1270

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
Epiteeliglykoproteiini 2 (EGP2), sytokeratiini 19
Onkogeenit
Her2/neu-, p53+ (yliekspressoitunut)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
49 vuotta
Etnisyys
Afroamerikkalainen