Pāriet uz saturu
HCC70
Audums
Krūts dziedzeris
Slimība
Krūts duktālā karcinoma
Sinonīmi
HCC-70, HCC 70, HCC0070, Hamon Cancer Center 70

Dokumenti

HCC70

Cell line · Preces numurs 305464

The HCC70 cell line is derived from a triple-negative breast cancer (TNBC), a subtype that lacks expression of estrogen, progesterone, and HER2 receptors,...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HCC70 šūnu līnija ir iegūta no trīskārši negatīva krūts vēža (TNBC) - apakštipa, kurā nav estrogēna, progesterona un HER2 receptoru ekspresijas, tāpēc to ir grūti ārstēt ierobežotu mērķterapiju dēļ. HCC70 šūnas izceļas ar to, ka TNBC apakštipu ietvaros tās klasificētas kā 1. bāzes tipa (BL1) šūnas, kas ietekmē to reakciju uz ķīmijterapiju un ārstēšanas stratēģijām. Svarīgi ir tas, ka HCC70 šūnās ir ievērojams G-proteīna saistītā estrogēna receptora GPR30 ekspresijas līmenis. GPR30 ir saistīts ar ātru signālu reakciju uz estrogēniem, piemēram, 17β-estradiolu, kas ietekmē šūnu proliferāciju un citus onkogēnus.

Galvenā HCC70 ģenētiskā pazīme ir TP53 mutācija, jo īpaši R248Q variants. Šī mutācija ir saistīta ar funkciju ieguvuma (GOF) fenotipiem, kas veicina vēža šūnu izdzīvošanu un agresīvu uzvedību. Pētījumos R248Q mutācija HCC70 šūnās ir saistīta ar paaugstinātu šūnu deformējamību un izmainītu PARP1 lokalizāciju, kas nozīmē potenciālu jutību pret PARP inhibitoriem.

Pētījumos par HCC70 un līdzīgu TNBC šūnu līniju reakciju uz zālēm ir uzsvērta proteazomu inhibitoru un uz platīnu balstītu terapiju efektivitāte. Šie ārstēšanas veidi ir daudzsološi, un tādas zāles kā bortezomibs uzrāda citotoksisku iedarbību. Savstarpējā mijiedarbība starp ķīmijterapijas rezistenci un specifisku receptoru signalizāciju, piemēram, GPR30 starpniecību, uzsver, cik sarežģīti ir iedarboties uz tādiem TNBC apakštipiem kā HCC70.

Audums
Krūts dziedzeris
Slimība
Krūts duktālā karcinoma
Sinonīmi
  • HCC-70
  • HCC 70
  • HCC0070
  • Hamon Cancer Center 70

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Epitēlija šūna

04Identifikatori

Atsauce
HCC70 (Cytion kataloga numurs 305464)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1270

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Epitēlija glikoproteīns 2 (EGP2), citokeratīns 19
Onkogēni
Her2/neu-, p53+ (pārmērīga ekspresija)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
49 gadi
Etniskā piederība
Afroamerikānis