
- Tissue
- Glândula mamária
- Disease
- Carcinoma ductal da mama
- Synonyms
- HCC-70, HCC 70, HCC0070, Hamon Cancer Center 70
Documents
HCC70
Cell line · Product number 305464
The HCC70 cell line is derived from a triple-negative breast cancer (TNBC), a subtype that lacks expression of estrogen, progesterone, and HER2 receptors,...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
A linhagem celular HCC70 é derivada de um câncer de mama triplo-negativo (TNBC), um subtipo que não apresenta expressão dos receptores de estrogênio, progesterona e HER2, o que dificulta seu tratamento devido às terapias direcionadas limitadas. As células HCC70 se destacam por sua classificação como “basal-like 1” (BL1) entre os subtipos de TNBC, o que influencia sua resposta à quimioterapia e às estratégias de tratamento. É importante ressaltar que as células HCC70 expressam o receptor de estrogênio acoplado à proteína G (GPR30) em níveis significativos. O GPR30 tem sido associado a respostas rápidas de sinalização a estrogênios como o 17β-estradiol, influenciando a proliferação celular e outras vias oncogênicas.
Uma característica genética fundamental do HCC70 é a presença de uma mutação no TP53, especificamente a variante R248Q. Essa mutação está associada a fenótipos de ganho de função (GOF) que contribuem para a sobrevivência das células cancerosas e para seu comportamento agressivo. Em estudos, a mutação R248Q nas células HCC70 foi associada ao aumento da deformabilidade celular e à alteração da localização da PARP1, o que sugere uma potencial sensibilidade aos inibidores da PARP.
Pesquisas sobre respostas a medicamentos no HCC70 e em linhagens celulares semelhantes de TNBC destacaram a eficácia de inibidores do proteassoma e de terapias à base de platina. Esses tratamentos têm se mostrado promissores, com medicamentos como o bortezomib demonstrando efeitos citotóxicos. A interação entre a resistência à quimioterapia e a sinalização de receptores específicos, como a mediada pelo GPR30, ressalta a complexidade do direcionamento a subtipos de TNBC, como aqueles modelados pela HCC70.
- Tissue
- Glândula mamária
- Disease
- Carcinoma ductal da mama
- Synonyms
- HCC-70
- HCC 70
- HCC0070
- Hamon Cancer Center 70
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Cell type
- Célula epitelial
04Identifiers
- Citation
- HCC70 (número de catálogo da Cytion 305464)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1270
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- Glicoproteína epitelial 2 (EGP2), citoqueratina 19
- Oncogenes
- Her2/neu negativo, p53 positivo (sobreexpressão)
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- 49 anos
- Ethnicity
- afro-americano
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes