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HCC70
Gewebe
Brustdrüse
Krankheit
Duktales Karzinom der Brust
Synonyme
HCC-70, HCC 70, HCC0070, Hamon Cancer Center 70

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HCC70

Cell line · Artikelnummer 305464

The HCC70 cell line is derived from a triple-negative breast cancer (TNBC), a subtype that lacks expression of estrogen, progesterone, and HER2 receptors,...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die HCC70-Zelllinie stammt von dreifach negativem Brustkrebs (TNBC), einem Subtyp, der keine Östrogen-, Progesteron- und HER2-Rezeptoren aufweist, was die Behandlung aufgrund begrenzter zielgerichteter Therapien erschwert. HCC70-Zellen zeichnen sich durch ihre Basal-like 1 (BL1)-Klassifizierung innerhalb der TNBC-Subtypen aus, was sich auf ihr Ansprechen auf Chemotherapie und Behandlungsstrategien auswirkt. Wichtig ist, dass HCC70-Zellen den G-Protein-gekoppelten Östrogenrezeptor GPR30 in erheblichem Umfang exprimieren. GPR30 wird mit schnellen Signalreaktionen auf Östrogene wie 17β-Östradiol in Verbindung gebracht und beeinflusst die Zellproliferation und andere onkogene Signalwege.

Ein wichtiges genetisches Merkmal von HCC70 ist das Vorhandensein einer TP53-Mutation, insbesondere der Variante R248Q. Diese Mutation wird mit Gain-of-Function (GOF)-Phänotypen in Verbindung gebracht, die zum Überleben der Krebszellen und zu einem aggressiven Verhalten beitragen. In Studien wurde die R248Q-Mutation in HCC70-Zellen mit einer erhöhten Zelldeformierbarkeit und einer veränderten PARP1-Lokalisierung in Verbindung gebracht, was auf eine potenzielle Empfindlichkeit gegenüber PARP-Inhibitoren schließen lässt.

Forschungen zum Ansprechen auf Medikamente bei HCC70 und ähnlichen TNBC-Zelllinien haben die Wirksamkeit von Proteasom-Inhibitoren und platinbasierten Therapien hervorgehoben. Diese Behandlungen haben sich als vielversprechend erwiesen, wobei Medikamente wie Bortezomib eine zytotoxische Wirkung zeigen. Das Zusammenspiel zwischen Chemotherapieresistenz und spezifischer Rezeptorsignalisierung, wie sie durch GPR30 vermittelt wird, unterstreicht die Komplexität der Behandlung von TNBC-Subtypen, wie sie das HCC70 darstellt.

Gewebe
Brustdrüse
Krankheit
Duktales Karzinom der Brust
Synonyme
  • HCC-70
  • HCC 70
  • HCC0070
  • Hamon Cancer Center 70

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Zelltyp
Epithelzelle

04Bezeichner

Quellenangabe
HCC70 (Cytion-Katalognummer 305464)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1270

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
Epitheliales Glykoprotein 2 (EGP2), Zytokeratin 19
Onkogene
Her2/neu-, p53+ (überexprimiert)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
49 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Afroamerikaner