Přejít na obsah
HCC70
Tkáň
Mléčná žláza
Nemoc
Duktální karcinom prsu
Synonyma
HCC-70, HCC 70, HCC0070, Hamon Cancer Center 70

Dokumenty

HCC70

Cell line · Číslo výrobku 305464

The HCC70 cell line is derived from a triple-negative breast cancer (TNBC), a subtype that lacks expression of estrogen, progesterone, and HER2 receptors,...

€550.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie HCC70 je odvozena od triple-negativního karcinomu prsu (TNBC), což je podtyp, který postrádá expresi estrogenových, progesteronových a HER2 receptorů, což ztěžuje jeho léčbu kvůli omezeným možnostem cílené terapie. Buňky HCC70 se vyznačují tím, že jsou v rámci podtypů TNBC klasifikovány jako bazálně podobné 1 (BL1), což ovlivňuje jejich odpověď na chemoterapii a léčebné strategie. Důležité je, že buňky HCC70 exprimují estrogenový receptor GPR30 spřažený s G-proteinem ve významném množství. GPR30 je spojován s rychlou signální odpovědí na estrogeny, jako je 17β-estradiol, a ovlivňuje buněčnou proliferaci a další onkogenní dráhy.

Klíčovou genetickou charakteristikou HCC70 je přítomnost mutace TP53, konkrétně varianty R248Q. Tato mutace je spojena s fenotypy GOF (gain-of-function), které přispívají k přežívání a agresivnímu chování nádorových buněk. Ve studiích byla mutace R248Q v buňkách HCC70 spojena se zvýšenou deformovatelností buněk a změněnou lokalizací PARP1, což znamená potenciální citlivost na inhibitory PARP.

Výzkum reakcí na léčiva u buněčných linií HCC70 a podobných buněk TNBC zdůraznil účinnost inhibitorů proteazomu a léčby založené na platině. Tyto léčebné postupy se ukázaly jako slibné, přičemž léky jako bortezomib vykazují cytotoxické účinky. Vzájemné působení mezi rezistencí na chemoterapeutika a specifickou receptorovou signalizací, jako je například signalizace zprostředkovaná GPR30, podtrhuje složitost cílení na podtypy TNBC, jako jsou ty, které modeluje HCC70.

Tkáň
Mléčná žláza
Nemoc
Duktální karcinom prsu
Synonyma
  • HCC-70
  • HCC 70
  • HCC0070
  • Hamon Cancer Center 70

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Epitelová buňka

04Identifikátory

Citace
HCC70 (katalogové číslo Cytion 305464)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1270

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
Epiteliální glykoprotein 2 (EGP2), cytokeratin 19
Onkogeny
Her2/neu-, p53+ (nadměrná exprese)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
49 let
Etnická příslušnost
Afroameričan