Prejsť na obsah
HCC70
Tkanivo
Mliečna žľaza
Choroba
Duktálny karcinóm prsníka
Synonymá
HCC-70, HCC 70, HCC0070, Hamon Cancer Center 70

Dokumenty

HCC70

Cell line · Číslo výrobku 305464

The HCC70 cell line is derived from a triple-negative breast cancer (TNBC), a subtype that lacks expression of estrogen, progesterone, and HER2 receptors,...

€550.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia HCC70 je odvodená od triple-negatívneho karcinómu prsníka (TNBC), podtypu, ktorý nemá expresiu estrogénových, progesterónových a HER2 receptorov, čo sťažuje jeho liečbu z dôvodu obmedzených možností cielenej terapie. Bunky HCC70 sa vyznačujú tým, že sú v rámci podtypov TNBC zaradené do kategórie bazálneho typu 1 (BL1), čo ovplyvňuje ich odpoveď na chemoterapiu a stratégie liečby. Dôležité je, že bunky HCC70 vo významnej miere exprimujú estrogénový receptor GPR30 viazaný na G-proteín. GPR30 sa spája s rýchlou signálnou odozvou na estrogény, ako je 17β-estradiol, a ovplyvňuje proliferáciu buniek a ďalšie onkogénne dráhy.

Kľúčovou genetickou charakteristikou HCC70 je prítomnosť mutácie TP53, konkrétne variantu R248Q. Táto mutácia sa spája s fenotypmi GOF (gain-of-function), ktoré prispievajú k prežívaniu rakovinových buniek a ich agresívnemu správaniu. V štúdiách bola mutácia R248Q v bunkách HCC70 spojená so zvýšenou deformovateľnosťou buniek a zmenenou lokalizáciou PARP1, čo znamená potenciálnu citlivosť na inhibítory PARP.

Výskum reakcií na lieky v HCC70 a podobných bunkových líniách TNBC poukázal na účinnosť inhibítorov proteazómu a terapie na báze platiny. Tieto liečby sa ukázali ako sľubné, pričom lieky ako bortezomib vykazujú cytotoxické účinky. Vzájomné pôsobenie medzi chemoterapeutickou rezistenciou a špecifickou receptorovou signalizáciou, ako je napríklad signalizácia sprostredkovaná GPR30, podčiarkuje zložitosť cieleného pôsobenia na podtypy TNBC, ako sú tie, ktoré modeluje HCC70.

Tkanivo
Mliečna žľaza
Choroba
Duktálny karcinóm prsníka
Synonymá
  • HCC-70
  • HCC 70
  • HCC0070
  • Hamon Cancer Center 70

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Typ bunky
Epitelová bunka

04Identifikátory

Citácia
HCC70 (katalógové číslo Cytion 305464)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1270

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
Epitelový glykoproteín 2 (EGP2), cytokeratín 19
Onkogény
Her2/neu-, p53+ (nadmerne exprimovaný)

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
49 rokov
Etnická príslušnosť
Afroameričan