Премини към съдържанието
Human Mesenchymal Stem Cells, Chorion Villi
Тъкан
Хорион вили

Документи

Human Mesenchymal Stem Cells, Chorion Villi

Cell line · Номер на продукта 300646

Human Mesenchymal Stem Cells (MSCs) derived from chorion villi represent a highly versatile population of multipotent stromal cells capable of differentia...

€690.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Човешките мезенхимни стволови клетки (MSCs), получени от хорионни вили, представляват многофункционална популация от мултипотентни стромални клетки, способни да се диференцират в множество линии, включително адипоцити, остеобласти и хондроцити. Тези клетки се изолират от хорионните вили, част от плацентата, която играе критична роля в обмена между майката и плода. Хорионните власинки са уникални, тъй като са съставени както от фетални, така и от майчини тъкани, осигурявайки отличителна микросреда, която допринася за силните способности за самообновяване и диференциация на MSC, получени от този източник. MSC от хорионните власинки проявяват по-примитивен фенотип в сравнение с MSC, получени от възрастни тъкани, като често показват по-висока степен на пролиферация и по-широк потенциал за диференциация. Тези характеристики ги правят особено ценни за изследвания в областта на регенеративната медицина, тъканното инженерство и моделирането на заболявания.

Тези МСК са строго доказани in vitro, че се диференцират в адипоцити, остеобласти и хондроцити, когато се култивират в специфични за линията диференциационни среди, което подчертава потенциала им за приложение в регенерацията на тъкани и моделирането на заболявания. Уникалният произход на тези клетки от хорионните вили им придава специфични имуномодулиращи свойства, които могат да се различават от МСК, получени от други източници, като костен мозък или мастна тъкан. Тази разлика е от решаващо значение за проучвания, фокусирани върху имунологични състояния или разработване на алогенни клетъчни терапии.

МСК се криоконсервират в ранни пасажи в специализирана криомедиум, което гарантира тяхната жизнеспособност и функционалност след размразяване. Всяка криовиалка съдържа минимум 1 x 106 клетки с жизнеспособност между 92% и 95%, определена чрез теста за изключване с боя Trypan Blue. Тези клетки са получени от здрави донори, които са дали информирано съгласие, което гарантира етични практики на събиране. Всяка партида преминава през строги оценки за контрол на качеството, включително задълбочени тестове за идентификация, чистота, потентност и жизнеспособност на клетките. Тези мерки гарантират, че култивираните MSC са с високо качество и подходящи за изследователски приложения, с изключение на терапевтична употреба или употреба in vivo.

Тъкан
Хорион вили
Приложения
Тестване на лекарства, регенеративна медицина, изследване на заболявания

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Не е посочено
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Добре разпространена вретеновидна, подобна на фибробласт морфология за поне 5 пасажа. По-малко от 2 % от клетките показват спонтанна миофибробластоподобна морфология в рамките на всеки пасаж.
Тип клетка
Стволови клетки

04Идентификатори

Източник
Човешки мезенхимни стволови клетки, хорион вили (каталожен номер 300646 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606

05Проява и предразположеност

Експресия на антигена
За идентифициране на култивирани MSCs (P2-P3) преди криоконсервация се използва обширен панел от маркери, включително CD73/CD90/CD105 (положителни) и CD14/CD34/CD45/HLA-DR (отрицателни), при анализ с поточна цитометрия. Тези маркери се препоръчват от комитета на ISCT за MSC.
Вируси
Донорът е отрицателен за HBV (PCR), Treponema pallidum (PCR) и HIV-1/2 (IFA). Клетките са отрицателни за HBV, HCV, HSV1, HSV2, CMV, EBV, HHV6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum и Ureaplasma parvum.

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
Alpha MEM, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w/o: Рибонуклеозиди, w/o: Дезоксирибонуклеозиди, w: 1,0 mM Натриев пируват, w: 2,2 g/L NaHCO3
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS, 2 ng/mL bFGF
Реагент за дисоциация
Трипсин-EDTA
Пресаждане
За рутинни адхезивни клетъчни култури: Аспирирайте старата хранителна среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, за да отстраните останалата среда. След като аспирирате PBS, добавете подходящия обем разтвор на трипсин/EDTA в зависимост от размера на съда за култивиране (напр. 1 ml за колба Т25, 3 ml за колба Т75) и инкубирайте при стайна температура или 37 °C, докато клетките се отделят (5-10 минути). Наблюдавайте отделянето под микроскоп и при необходимост леко потупайте съда, за да освободите клетките. След като се отделят, добавете пълна среда, за да инактивирате трипсина/EDTA, внимателно ресуспендирайте клетките и прехвърлете аликвотна част от клетъчната суспензия в нов съд за култивиране, съдържащ прясна среда. Поставете съда в инкубатор, настроен на 37 °C с 5 %CO2, и сменяйте средата на всеки 2-3 дни.
Плътност на засяването
1 до 3 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
Първоначално подновяване на течността след 24 часа, а след това на всеки 2 до 3 дни.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме 80% FBS + 10% основна среда + 10% DMSO за поддържане на жизнеспособността или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion) за по-добра криозащита, предотвратяваща нежелана диференциация и запазваща плурипотентността.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
Моля, попитайте
Етническа принадлежност
Кавказки