Pereiti prie turinio
Human Mesenchymal Stem Cells, Chorion Villi
Audinys
Chorion Villi

Dokumentai

Human Mesenchymal Stem Cells, Chorion Villi

Cell line · Prekės numeris 300646

Human Mesenchymal Stem Cells (MSCs) derived from chorion villi represent a highly versatile population of multipotent stromal cells capable of differentia...

€690.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

Žmogaus mezenchiminės kamieninės ląstelės (MSC), gautos iš choriono vilnių, yra labai universali daugiafunkcinių stromos ląstelių populiacija, galinti diferencijuotis į įvairias ląstelių linijas, įskaitant adipocitus, osteoblastus ir chondrocitus. Šios ląstelės yra izoliuojamos iš choriono vilnių, placentos dalies, kuri atlieka svarbų vaidmenį motinos ir vaisiaus medžiagų apykaitoje. Choriono vilnos yra unikalios tuo, kad jas sudaro tiek vaisiaus, tiek motinos audiniai, sudarantys savitą mikroaplinką, kuri prisideda prie iš šio šaltinio gautų MSC stiprių savęs atsinaujinimo ir diferenciacijos gebėjimų. MSC iš choriono vilnų pasižymi primityvesniu fenotipu, palyginti su MSC, gautomis iš suaugusių audinių, dažnai pasižymi didesniu proliferacijos greičiu ir platesniu diferenciacijos potencialu. Dėl šių savybių jos yra ypač vertingos regeneracinės medicinos, audinių inžinerijos ir ligų modeliavimo tyrimams.

Buvo griežtai įrodyta in vitro, kad šios MSC diferencijuojasi į adipocitus, osteoblastus ir chondrocitus, kai yra kultivuojamos linijos specifiniuose diferenciacijos terpėse, o tai pabrėžia jų potencialą audinių regeneracijai ir ligų modeliavimui. Dėl unikalios šių ląstelių kilmės iš choriono vilnių jos turi specifinių imunomoduliuojančių savybių, kurios gali skirtis nuo MSC, gautų iš kitų šaltinių, pvz., kaulų čiulpų ar riebalinio audinio. Šis skirtumas yra labai svarbus tyrimams, susijusiems su imuninėmis ligomis arba alogeninių ląstelių terapijos kūrimu.

MSC yra kriokonservuojamos ankstyvose fazėse specializuotoje kriomedijoje, užtikrinant jų gyvybingumą ir funkcionalumą po atšildymo. Kiekvienoje krioviale yra mažiausiai 1 x 106 ląstelių, kurių gyvybingumas svyruoja nuo 92 % iki 95 %, kaip nustatyta Trypan Blue dažo išskyrimo testu. Šios ląstelės yra gaunamos iš sveikų donorų, kurie davė informuotą sutikimą, užtikrinant etišką surinkimo praktiką. Kiekviena partija yra griežtai tikrinama, įskaitant išsamų ląstelių identifikavimo, grynumo, stiprumo ir gyvybingumo tyrimą. Šios priemonės užtikrina, kad kultivuotos MSC yra aukštos kokybės ir tinkamos moksliniams tyrimams, išskyrus terapinį ar in vivo naudojimą.

Audinys
Chorion Villi
Paraiškos
Vaistų tyrimai, regeneracinė medicina, ligų tyrimai

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Nenurodyta
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Gerai išsidėsčiusi verpstės formos, į fibroblastus panaši morfologija bent per 5 ištraukas. Mažiau nei 2 % ląstelių pasižymi spontaniška į miofibroblastus panašia morfologija per kiekvieną perėjimą.
Ląstelių tipas
Kamieninės ląstelės

04Identifikatoriai

Nuoroda
Žmogaus mezenchiminės kamieninės ląstelės, choriono villi (Cytion katalogo numeris 300646)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
Prieš kriokonservavimą kultivuotiems MSC (P2-P3) identifikuoti naudojama išsami žymenų grupė, įskaitant CD73/CD90/CD105 (teigiami) ir CD14/CD34/CD45/HLA-DR (neigiami). Šiuos žymenis rekomenduoja ISCT MSC komitetas.
Virusai
Donoras yra neigiamas dėl HBV (PGR), Treponema pallidum (PGR) ir ŽIV-1/2 (IFA). Ląstelės yra neigiamos dėl HBV, HCV, HSV1, HSV2, CMV, EBV, HHV6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum ir Ureaplasma parvum.

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
Alfa MEM, w: 2,0 mM stabilus glutaminas, w/o: Ribonukleozidai, w/o: Deoksiribonukleozidai, w: 1,0 mM natrio piruvatas, w: 2,2 g/l NaHCO3
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS, 2 ng/ml bFGF
Disociacijos reagentas
Trypsino ir EDTA
Subkultūrinis auginimas
Įprastinėms adherentinėms ląstelių kultūroms: Kad pašalintumėte visą likusią terpę, iš adherentinių ląstelių išsiurbkite seną terpę ir nuplaukite jas PBS. Išsiurbę PBS, įpilkite reikiamą kiekį tripsino ir EDTA tirpalo, atsižvelgiant į kultūros indo dydį (pvz., 1 ml T25 kolbai, 3 ml T75 kolbai), ir inkubuokite kambario arba 37 °C temperatūroje, kol ląstelės atsiskirs (5-10 min.). Stebėkite atsiskyrimą per mikroskopą ir, jei reikia, švelniai palieskite indą, kad ląstelės išsilaisvintų. Kai ląstelės atsiskiria, įpilkite pilną terpę, kad būtų inaktyvuotas tripsinas/EDTA, atsargiai reuspenduokite ląsteles ir perkelkite alikvotą ląstelių suspensijos į naują auginimo indą su šviežia terpe. Įstatykite indą į inkubatorių, kuriame nustatyta 37 °C temperatūra ir 5 %CO2, o terpę keiskite kas 2-3 dienas.
Sėjos tankis
1–3 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
Pirmą kartą skysčiai atnaujinami po 24 valandų, vėliau - kas 2-3 dienas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame 80 % FBS + 10 % bazinę terpę + 10 % DMSO gyvybingumui palaikyti arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kuri užtikrina geresnę kriokonservavimo apsaugą, apsaugo nuo nepageidaujamos diferenciacijos ir kartu išsaugo pluripotenciją.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
Prašome teirautis
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių