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Human Mesenchymal Stem Cells, Chorion Villi
Pañuelo de papel
Vellosidades del corion

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Human Mesenchymal Stem Cells, Chorion Villi

Cell line · Número de producto 300646

Human Mesenchymal Stem Cells (MSCs) derived from chorion villi represent a highly versatile population of multipotent stromal cells capable of differentia...

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1

01Información general

Descripción

Las células madre mesenquimales humanas (MSC) derivadas de las vellosidades coriónicas representan una población muy versátil de células estromales multipotentes capaces de diferenciarse en múltiples linajes, incluidos adipocitos, osteoblastos y condrocitos. Estas células se aíslan de las vellosidades coriónicas, una parte de la placenta que desempeña un papel fundamental en el intercambio materno-fetal. Las vellosidades coriónicas son únicas, ya que están compuestas por tejidos fetales y maternos, lo que proporciona un microambiente distintivo que contribuye a las sólidas capacidades de autorrenovación y diferenciación de las MSC derivadas de esta fuente. Las MSC de las vellosidades coriónicas presentan un fenotipo más primitivo en comparación con las MSC derivadas de tejidos adultos, y a menudo muestran una mayor tasa de proliferación y un mayor potencial de diferenciación. Estas características las hacen especialmente valiosas para la investigación en medicina regenerativa, ingeniería de tejidos y modelización de enfermedades.

Se ha demostrado rigurosamente in vitro que estas MSC se diferencian en adipocitos, osteoblastos y condrocitos cuando se cultivan en medios de diferenciación específicos de cada linaje, lo que subraya su potencial para aplicaciones en la regeneración de tejidos y la modelización de enfermedades. El origen único de estas células de las vellosidades coriónicas les confiere propiedades inmunomoduladoras específicas, que pueden diferir de las MSC derivadas de otras fuentes, como la médula ósea o el tejido adiposo. Esta distinción es crucial para los estudios centrados en afecciones relacionadas con el sistema inmunitario o en el desarrollo de terapias celulares alogénicas.

Las MSC se criopreservan en pases tempranos en un criomedio especializado, lo que garantiza su viabilidad y funcionalidad después de la descongelación. Cada criovial contiene un mínimo de 1 x 106 células con una tasa de viabilidad que oscila entre el 92 % y el 95 %, según lo determinado por la prueba de exclusión con azul de tripano. Estas células proceden de donantes sanos que han dado su consentimiento informado, lo que garantiza prácticas de recolección éticas. Cada lote se somete a estrictas evaluaciones de control de calidad, que incluyen pruebas exhaustivas de identificación, pureza, potencia y viabilidad de las células. Estas medidas garantizan que las MSC cultivadas sean de alta calidad y adecuadas para aplicaciones de investigación, excluyendo el uso terapéutico o in vivo.

Pañuelo de papel
Vellosidades del corion
Aplicaciones
Análisis de fármacos, medicina regenerativa, investigación de enfermedades

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Sin especificar
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Morfología fusiforme y fibroblástica bien extendida durante al menos 5 pases. Menos del 2% de las células muestran una morfología espontánea similar a la de los miofibroblastos en cada pasaje.
Tipo de célula
Células madre

04Identificadores

Referencia
Células madre mesenquimales humanas, vellosidades del corion (Cytion número de catálogo 300646)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de antígenos
En el análisis de citometría de flujo se utiliza un amplio panel de marcadores, incluidos CD73/CD90/CD105 (positivos) y CD14/CD34/CD45/HLA-DR (negativos), para identificar las CMM cultivadas (P2-P3) antes de la criopreservación. Estos marcadores están recomendados por el comité de MSC del ISCT.
Virus
El donante es negativo para VHB (PCR), Treponema pallidum (PCR) y VIH-1/2 (IFA). Las células son negativas para VHB, VHC, VHS1, VHS2, CMV, VEB, VHH6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum y Ureaplasma parvum.

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
MEM alfa, con: 2,0 mM de glutamina estable, sin Ribonucleósidos, w/o: Desoxirribonucleósidos, w: 1,0 mM Piruvato sódico, w: 2,2g/L NaHCO3
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con 10% FBS, 2 ng/mL bFGF
Reactivo de disociación
Tripsina-EDTA
Subcultivo
Para el cultivo rutinario de células adherentes: Aspirar el medio de cultivo antiguo de las células adherentes y lavarlas con PBS para eliminar cualquier resto de medio. Después de aspirar el PBS, añadir el volumen apropiado de solución de tripsina/EDTA en función del tamaño del recipiente de cultivo (por ejemplo, 1 ml para un matraz T25, 3 ml para un matraz T75) e incubar a temperatura ambiente o 37°C hasta que las células se desprendan (5-10 minutos). Controlar el desprendimiento con un microscopio y, si es necesario, golpear suavemente el recipiente para liberar las células. Una vez desprendidas, añadir medio completo para inactivar la tripsina/EDTA, resuspender suavemente las células y transferir una alícuota de la suspensión celular a un nuevo recipiente de cultivo que contenga medio fresco. Colocar el recipiente en una incubadora a 37°C con un 5% deCO2 y cambiar el medio cada 2-3 días.
Densidad de siembra
De 1 a 3 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
Primera renovación de líquidos a las 24 horas, después cada 2 ó 3 días.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos 80% FBS + 10% medio basal + 10% DMSO para mantener la viabilidad, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion) para una crioprotección superior, evitando la diferenciación no deseada y preservando la pluripotencia.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
Infórmese
Origen étnico
Caucásico