Přejít na obsah
Human Mesenchymal Stem Cells, Chorion Villi
Tkáň
Chorion Villi

Dokumenty

Human Mesenchymal Stem Cells, Chorion Villi

Cell line · Číslo výrobku 300646

Human Mesenchymal Stem Cells (MSCs) derived from chorion villi represent a highly versatile population of multipotent stromal cells capable of differentia...

€690.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Lidské mezenchymální kmenové buňky (MSC) pocházející z chorionových klků představují vysoce univerzální populaci multipotentních stromálních buněk schopných diferenciace do více linií, včetně adipocytů, osteoblastů a chondrocytů. Tyto buňky jsou izolovány z chorionových klků, části placenty, která hraje klíčovou roli ve výměně látek mezi matkou a plodem. Chorionové klky jsou jedinečné v tom, že se skládají jak z fetálních, tak z mateřských tkání, což poskytuje specifické mikroprostředí, které přispívá k robustním schopnostem MSC odvozených z tohoto zdroje k sebeobnově a diferenciaci. MSC z chorionových klků vykazují primitivnější fenotyp ve srovnání s MSC odvozenými z dospělých tkání a často vykazují vyšší míru proliferace a širší diferenciační potenciál. Tyto vlastnosti je činí obzvláště cennými pro výzkum v oblasti regenerativní medicíny, tkáňového inženýrství a modelování nemocí.

Bylo důkladně prokázáno in vitro, že se tyto MSC diferencují na adipocyty, osteoblasty a chondrocyty, když jsou kultivovány v médiích specifických pro danou linii, což podtrhuje jejich potenciál pro aplikace v tkáňové regeneraci a modelování onemocnění. Jedinečný původ těchto buněk z chorionových klků jim propůjčuje specifické imunomodulační vlastnosti, které se mohou lišit od MSC odvozených z jiných zdrojů, jako je kostní dřeň nebo tuková tkáň. Tento rozdíl je zásadní pro studie zaměřené na imunitní stavy nebo vývoj alogenních buněčných terapií.

MSC jsou kryokonzervovány v raných pasážích ve specializovaném kryomédiu, což zajišťuje jejich životaschopnost a funkčnost po rozmrazení. Každá kryovialka obsahuje minimálně 1 x 106 buněk s mírou životaschopnosti v rozmezí 92 % až 95 %, jak bylo stanoveno testem vyloučení barvivem Trypan Blue. Tyto buňky pocházejí od zdravých dárců, kteří poskytli informovaný souhlas, což zajišťuje etické postupy při odběru. Každá šarže prochází přísnou kontrolou kvality, včetně důkladného testování identifikace buněk, čistoty, účinnosti a životaschopnosti. Tato opatření zaručují, že kultivované MSC jsou vysoké kvality a vhodné pro výzkumné účely, s výjimkou terapeutického použití nebo použití in vivo.

Tkáň
Chorion Villi
Aplikace
Testování léčiv, regenerativní medicína, výzkum nemocí

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Nespecifikováno
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Dobře rozprostřená vřetenovitá morfologie podobná fibroblastům alespoň v rámci 5 pasáží. Méně než 2 % buněk vykazuje v každé pasáži spontánní morfologii podobnou myofibroblastům.
Typ buňky
Kmenové buňky

04Identifikátory

Citace
Lidské mezenchymální kmenové buňky, choriové klky (katalogové číslo Cytion 300646)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
K identifikaci kultivovaných MSC (P2-P3) před kryokonzervaci se při analýze průtokovou cytometrií používá komplexní panel markerů, včetně CD73/CD90/CD105 (pozitivní) a CD14/CD34/CD45/HLA-DR (negativní). Tyto markery jsou doporučeny výborem ISCT MSC.
Viry
Dárce je negativní na HBV (PCR), Treponema pallidum (PCR) a HIV-1/2 (IFA). Buňky jsou negativní na HBV, HCV, HSV1, HSV2, CMV, EBV, HHV6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum a Ureaplasma parvum.

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w/o: Ribonukleosidy, w/o: Deoxyribonukleosidy, w: 1,0 mM Pyruvát sodný, w: 2,2 g/l NaHCO3
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS, 2 ng/ml bFGF
Disociační činidlo
Trypsin-EDTA
Subkultivace
Pro běžné kultivace adherentních buněk: Z adherentních buněk odsaďte staré kultivační médium a promyjte je PBS, abyste odstranili veškeré zbývající médium. Po odsátí PBS přidejte odpovídající objem roztoku trypsinu/EDTA podle velikosti kultivační nádoby (např. 1 ml pro baňku T25, 3 ml pro baňku T75) a inkubujte při pokojové teplotě nebo 37 °C, dokud se buňky neoddělí (5-10 minut). Oddělování sledujte pod mikroskopem a v případě potřeby jemně poklepejte na nádobu, aby se buňky uvolnily. Po oddělení přidejte kompletní médium k inaktivaci trypsinu/EDTA, jemně resuspendujte buňky a alikvotní část buněčné suspenze přeneste do nové kultivační nádoby obsahující čerstvé médium. Umístěte nádobu do inkubátoru nastaveného na 37 °C s 5 %CO2 a každé 2 až 3 dny vyměňte médium.
Hustota výsevu
1 až 3 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
První obnova tekutin po 24 hodinách, poté každé 2 až 3 dny.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme 80 % FBS + 10 % bazálního média + 10 % DMSO pro udržení životaschopnosti nebo CM-1 (katalogové číslo Cytion 800100) pro lepší kryoprotekci, která zabraňuje nežádoucí diferenciaci a zároveň zachovává pluripotenci.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
Zeptejte se prosím
Etnická příslušnost
Kavkazský