Siirry sisältöön
Human Mesenchymal Stem Cells, Chorion Villi
Kudos
Chorion Villi

Asiakirjat

Human Mesenchymal Stem Cells, Chorion Villi

Cell line · Tuotenumero 300646

Human Mesenchymal Stem Cells (MSCs) derived from chorion villi represent a highly versatile population of multipotent stromal cells capable of differentia...

€690.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Koriinivillistä peräisin olevat ihmisen mesenkymaaliset kantasolut (MSC) ovat erittäin monipuolinen populaatio monipotentteja stromasoluja, jotka kykenevät erilaistumaan useiksi solulinjoiksi, kuten rasvasoluihin, osteoblasteihin ja kondrosyytteihin. Nämä solut eristetään koriinivillistä, joka on osa istukkaa ja jolla on tärkeä rooli äidin ja sikiön välisessä aineenvaihdunnassa. Korionvillukset ovat ainutlaatuisia, koska ne koostuvat sekä sikiön että äidin kudoksista, mikä tarjoaa ainutlaatuisen mikroympäristön, joka edistää tästä lähteestä peräisin olevien MSC-solujen vahvaa itsensä uudistumista ja erilaistumiskykyä. Korionvilluksista peräisin olevat MSC-solut ovat primitiivisempiä kuin aikuisten kudoksista peräisin olevat MSC-solut, ja niillä on usein suurempi proliferaatioaste ja laajempi erilaistumispotentiaali. Nämä ominaisuudet tekevät niistä erityisen arvokkaita regeneratiivisen lääketieteen, kudostekniikan ja tautimallinnuksen tutkimuksessa.

Näiden mesenkymaalisolujen on in vitro osoitettu erilaistuvan adiposyytteiksi, osteoblasteiksi ja kondrosyytteiksi, kun niitä viljellään linjakohtaisissa erilaistumismedioissa, mikä korostaa niiden potentiaalia kudosregeneraatiossa ja tautien mallintamisessa. Näiden korionvilluksista peräisin olevien solujen ainutlaatuinen alkuperä antaa niille erityisiä immunomoduloivia ominaisuuksia, jotka voivat poiketa muista lähteistä, kuten luuytimestä tai rasvakudoksesta peräisin olevista MSC-soluista. Tämä ero on ratkaiseva immuunijärjestelmään liittyvien sairauksien tutkimuksessa tai allogeenisten soluterapioiden kehittämisessä.

MSC-solut kryosäilytetään varhaisessa vaiheessa erityisessä kryoväliaineessa, mikä varmistaa niiden elinkelpoisuuden ja toiminnallisuuden sulatuksen jälkeen. Jokainen kryopullo sisältää vähintään 1 x 106 solua, joiden elinkelpoisuusaste on 92–95 % Trypan Blue -väriaineen poissulkemistestin mukaan. Nämä solut ovat peräisin terveiltä luovuttajilta, jotka ovat antaneet tietoon perustuvan suostumuksensa, mikä varmistaa eettiset keräyskäytännöt. Jokainen erä käy läpi tiukat laadunvalvontatestit, mukaan lukien perusteelliset testit solujen tunnistamiseksi, puhtauden, tehon ja elinkelpoisuuden varmistamiseksi. Nämä toimenpiteet takaavat, että viljellyt MSC-solut ovat korkealaatuisia ja sopivia tutkimuskäyttöön, lukuun ottamatta terapeuttista tai in vivo -käyttöä.

Kudos
Chorion Villi
Sovellukset
Lääketestaus, regeneratiivinen lääketiede, sairauksien tutkimus

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Hyvin levinnyt karanmuotoinen, fibroblastin kaltainen morfologia vähintään 5 läpiviennin ajan. Alle 2 %:lla soluista on spontaani myofibroblastin kaltainen morfologia kussakin läpiviennissä.
Solutyyppi
Kantasolu

04Tunnisteet

Lähdeviite
Ihmisen mesenkymaaliset kantasolut, Chorion Villi (Cytionin luettelonumero 300646)
NCBI-verotunnus
9606

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
Virtaussytometria-analyysissä käytetään kattavaa merkkiainepaneelia, mukaan lukien CD73/CD90/CD105 (positiivinen) ja CD14/CD34/CD45/HLA-DR (negatiivinen), viljeltyjen MSC:iden (P2-P3) tunnistamiseksi ennen kryosäilytystä. ISCT:n MSC-komitea suosittelee näitä merkkiaineita.
Virukset
Luovuttaja on negatiivinen HBV:n (PCR), Treponema pallidumin (PCR) ja HIV-1/2:n (IFA) suhteen. Solut ovat negatiivisia HBV:n, HCV:n, HSV1:n, HSV2:n, CMV:n, EBV:n, HHV6:n, Toxoplasma gondii:n, Treponema pallidumin, Chlamydia trachomatis:n, Ureaplasma urealyticum:n ja Ureaplasma parvum:n suhteen.

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiili glutamiini, w/o: Ribonukleosidit, w/o: Deoksiribonukleosidit, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia, w: 2,2g/L NaHCO3
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Lisätään väliaineeseen 10 % FBS, 2 ng/ml bFGF
Dissosiaatioreagenssi
Trypsin-EDTA
Soluviljely
Rutiininomaiseen adherenttiseen soluviljelyyn: Imeytä vanha elatusaine adheesiosoluista ja pese ne PBS:llä jäljellä olevan elatusaineen poistamiseksi. Kun PBS on imetty, lisätään sopiva määrä trypsiini/EDTA-liuosta viljelyastian koon mukaan (esim. 1 ml T25-pulloon, 3 ml T75-pulloon) ja inkuboidaan huoneenlämmössä tai 37 °C:ssa, kunnes solut irtoavat (5-10 minuuttia). Seuraa irtoamista mikroskoopilla ja napauta astiaa tarvittaessa varovasti solujen irrottamiseksi. Kun solut ovat irronneet, lisätään täyttä elatusainetta trypsiinin/EDTA:n inaktivoimiseksi, solut suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensiosta aliquota uuteen kasvatusastiaan, joka sisältää tuoretta elatusainetta. Aseta astia inkubaattoriin, jonka lämpötila on 37 °C jahiilidioksidipitoisuus 5 %, ja vaihda väliaine 2-3 päivän välein.
Kylvötiheys
1–3 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
Ensimmäinen nesteen uusiminen 24 tunnin kuluttua, sitten 2-3 päivän välein.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme 80 % FBS + 10 % perusmediaa + 10 % DMSO:ta elinkelpoisuuden säilyttämiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka tarjoaa erinomaisen kryosuojan ja estää ei-toivotun erilaistumisen säilyttäen samalla pluripotenssin.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Kysy lisää
Etnisyys
Kaukasialainen