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A498 Zellen
Gewebe
Niere
Krankheit
Nierenzellkarzinom
Synonyme
A-498

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A498 Zellen

Cell line · Artikelnummer 300113

A498-Zellen sind eine menschliche Nierenzellkarzinom-Zelllinie, die aus dem Nierengewebe eines 58-jährigen kaukasischen Mannes gewonnen wurde. Diese Zellen finden breite Anwendung in …

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

A498-Zellen sind eine menschliche Nierenzellkarzinom-Zelllinie, die aus dem Nierengewebe eines 58-jährigen kaukasischen Mannes stammt. Diese Zellen werden in der Forschung im Zusammenhang mit Nierenkrebs häufig verwendet, insbesondere zur Untersuchung des klarzelligen Nierenzellkarzinoms, der häufigsten Form von Nierenkrebs bei Erwachsenen.

Die A498-Zelllinie zeichnet sich durch ihre epithelähnliche Morphologie aus und ist ein wertvolles Modell für die Untersuchung der molekularen und zellulären Mechanismen der Nierenkrebsentstehung. Diese Zellen weisen mehrere für Nierenkrebs typische Merkmale auf, darunter Veränderungen in der Expression von Genen, die an der Zellzyklusregulation, Apoptose und Angiogenese beteiligt sind.

A498-Zellen eignen sich besonders für die Untersuchung der bei Nierenkrebs veränderten Stoffwechselwege, da sie ein ausgeprägtes Stoffwechselprofil aufweisen, das Veränderungen im Lipid- und Glukosestoffwechsel einschließt. Dadurch eignen sie sich für Studien zum metabolischen Targeting, bei denen untersucht wird, wie die Veränderung von Stoffwechselwegen das Tumorwachstum hemmen kann.

Außerdem werden A498-Zellen in der Arzneimittelforschung und in toxikologischen Studien eingesetzt, um die Wirksamkeit neuer Chemotherapeutika und gezielter Therapien zu testen. Sie werden auch verwendet, um die Reaktion von Nierenkrebszellen auf hypoxische Bedingungen zu untersuchen - ein häufiges Merkmal solider Tumore, das das Tumorverhalten und das Ansprechen auf die Behandlung erheblich beeinflusst.

Insgesamt ist die A498-Zelllinie ein wichtiges Instrument in der Nierenkrebsforschung, das die Entwicklung wirksamerer therapeutischer Strategien erleichtert und unser Verständnis der Biologie des Nierenkrebses verbessert.

Gewebe
Niere
Krankheit
Nierenzellkarzinom
Synonyme
  • A-498

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Tumorauslösend
Ja, in Nacktmäusen. Bildet undifferenzierte Karzinome, bildet auch Tumore in mit Anti-Thymozyten-Serum behandelten neugeborenen Mäusen
Ploidie-Status
Bimodal, tetraploid
MSI-Status
Stabil (MSS)
Verdopplungszeit
62 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
A498 (Cytion Katalognummer 300113)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1056

05Expression und Anfälligkeit

Isoenzyme
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 2, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm² führen innerhalb von 4 Tagen zu einer konfluenten Monoschicht.
Flüssigkeitswechsel
Alle 3 Tage
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 2 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 bis 48 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
52 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch