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Cellule A498
Tessuto
Rene
Malattia
Carcinoma a cellule renali
Sinonimi
A-498

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Cellule A498

Cell line · Codice prodotto 300113

Le cellule A498 sono una linea cellulare di carcinoma renale umano derivata dal tessuto renale di un uomo caucasico di 58 anni. Queste cellule sono ampiamente utilizzate in ...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule A498 sono una linea cellulare di carcinoma renale umano derivata dal tessuto renale di un uomo caucasico di 58 anni. Queste cellule sono ampiamente utilizzate nella ricerca sul cancro del rene, in particolare per studiare il carcinoma renale a cellule chiare, che è il tipo più comune di cancro del rene negli adulti.

La linea cellulare A498 è caratterizzata da una morfologia simile a quella epiteliale ed è stata un modello prezioso per studiare i meccanismi molecolari e cellulari della carcinogenesi renale. Queste cellule presentano diverse caratteristiche tipiche del carcinoma renale, tra cui alterazioni nell'espressione di geni coinvolti nella regolazione del ciclo cellulare, nell'apoptosi e nell'angiogenesi.

Le cellule A498 sono particolarmente utili per esaminare le vie metaboliche alterate nel tumore del rene, in quanto mostrano un profilo metabolico distinto che comprende alterazioni del metabolismo dei lipidi e del glucosio. Questo aspetto le rende adatte agli studi di targeting metabolico, che esplorano come l'alterazione delle vie metaboliche possa inibire la crescita tumorale.

Inoltre, le cellule A498 sono impiegate in studi di farmacologia e tossicologia per testare l'efficacia di nuovi agenti chemioterapici e terapie mirate. Vengono anche utilizzate per studiare la risposta delle cellule di cancro renale alle condizioni di ipossia, una caratteristica comune dei tumori solidi che influenza in modo significativo il comportamento del tumore e la risposta al trattamento.

Nel complesso, la linea cellulare A498 è uno strumento essenziale per la ricerca sul cancro renale, che facilita lo sviluppo di strategie terapeutiche più efficaci e migliora la nostra comprensione della biologia del cancro renale.

Tessuto
Rene
Malattia
Carcinoma a cellule renali
Sinonimi
  • A-498

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi nudi. Forma un carcinoma indifferenziato; forma tumori anche in topi neonati trattati con siero antitimocitario
Stato di ploidia
Bimodale, tetraploide
Stato MSI
Stabile (MSS)
Tempo di raddoppio
62 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
A498 (numero di catalogo Cytion 300113)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1056

05Espressione e suscettibilità

Isoenzimi
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 2, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2 darà origine a un monostrato confluente entro 4 giorni.
Rinnovo dei fluidi
Ogni 3 giorni
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 2 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24-48 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
52 anni
Etnia
Caucasico