Přejít na obsah
A498 Buňky
Tkáň
Ledviny
Nemoc
Karcinom ledviny
Synonyma
A-498

Dokumenty

A498 Buňky

Cell line · Číslo výrobku 300113

Buňky A498 jsou buněčná linie lidského karcinomu ledvin, která byla izolována z ledvinové tkáně 58letého muže kavkazského původu. Tyto buňky se hojně používají v ...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky A498 jsou buněčnou linií lidského renálního karcinomu odvozenou z ledvinové tkáně 58letého muže kavkazské rasy. Tyto buňky se hojně využívají ve výzkumu týkajícím se rakoviny ledvin, zejména ke studiu světlobuněčného karcinomu ledvin, který je nejčastějším typem rakoviny ledvin u dospělých.

Buněčná linie A498 se vyznačuje epiteliální morfologií a je cenným modelem pro zkoumání molekulárních a buněčných mechanismů karcinogeneze ledvin. Tyto buňky vykazují několik znaků typických pro rakovinu ledvin, včetně změn v expresi genů zapojených do regulace buněčného cyklu, apoptózy a angiogeneze.

Buňky A498 jsou zvláště užitečné pro zkoumání metabolických drah změněných u rakoviny ledvin, protože vykazují odlišný metabolický profil, který zahrnuje změny v metabolismu lipidů a glukózy. Díky tomuto aspektu jsou vhodné pro studie zaměřené na metabolismus, které zkoumají, jak může změna metabolických drah inhibovat růst nádoru.

Kromě toho se buňky A498 využívají při objevování léčiv a v toxikologických studiích k testování účinnosti nových chemoterapeutik a cílených terapií. Používají se také ke studiu reakce buněk karcinomu ledvin na hypoxické podmínky - běžný rys solidních nádorů, který významně ovlivňuje chování nádoru a odpověď na léčbu.

Celkově lze říci, že buněčná linie A498 slouží jako základní nástroj ve výzkumu rakoviny ledvin, který usnadňuje vývoj účinnějších léčebných strategií a zlepšuje naše chápání biologie rakoviny ledvin.

Tkáň
Ledviny
Nemoc
Karcinom ledviny
Synonyma
  • A-498

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Ano, na nahých myších. Tvoří nediferencovaný karcinom, tvoří také nádory u novorozených myší léčených antithymocytárním sérem
Ploidní stav
Bimodální, tetraploidní
Stav MSI
Stabilní (MSS)
Doba zdvojnásobení
62 hodin

04Identifikátory

Citace
A498 (katalogové číslo Cytion 300113)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1056

05Exprese a náchylnost

Isoenzymy
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 2, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2 vytvoří konfluentní monovrstvu během 4 dnů.
Obnova tekutin
Každé 3 dny
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 2 x 104 buněk/cm2 a nechte je zotavit se z procesu zmrazení a přilnout po dobu nejméně 24 až 48 hodin.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
52 let
Etnická příslušnost
Kavkazský