Siirry sisältöön
A498 Solut
Kudos
Munuaiset
Sairaus
Munuaissolusyöpä
Synonyymit
A-498

Asiakirjat

A498 Solut

Cell line · Tuotenumero 300113

A498-solut ovat ihmisen munuaissyöpäsolulinja, joka on peräisin 58-vuotiaan valkoihoisen miehen munuaiskudoksesta. Näitä soluja käytetään laajalti ...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

A498-solut ovat ihmisen munuaissolusyöpäsolulinja, joka on peräisin 58-vuotiaan valkoihoisen miehen munuaiskudoksesta. Näitä soluja käytetään laajalti munuaissyöpään liittyvässä tutkimuksessa, erityisesti selväsoluisen munuaissyövän tutkimisessa, joka on yleisin munuaissyöpätyyppi aikuisilla.

A498-solulinjalle on ominaista sen epiteelin kaltainen morfologia, ja se on ollut arvokas malli munuaisten karsinogeneesin molekyyli- ja solumekanismien tutkimiseen. Näillä soluilla on useita munuaissyövälle tyypillisiä piirteitä, kuten muutoksia solusyklin säätelyyn, apoptoosiin ja angiogeneesiin osallistuvien geenien ilmentymisessä.

A498-solut ovat erityisen käyttökelpoisia munuaissyövässä muuttuneiden aineenvaihduntareittien tutkimiseen, koska niillä on erilainen aineenvaihduntaprofiili, johon kuuluu muutoksia rasva- ja glukoosiaineenvaihdunnassa. Tämän vuoksi ne soveltuvat aineenvaihdunnan kohdentamistutkimuksiin, joissa tutkitaan, miten aineenvaihduntareittien muuttaminen voi estää kasvaimen kasvua.

Lisäksi A498-soluja käytetään lääkekehitys- ja toksikologisissa tutkimuksissa uusien kemoterapeuttisten aineiden ja kohdennettujen hoitojen tehokkuuden testaamiseksi. Niitä käytetään myös tutkimaan munuaissyöpäsolujen reaktiota hypoksisiin olosuhteisiin, mikä on kiinteissä kasvaimissa yleinen piirre, joka vaikuttaa merkittävästi kasvaimen käyttäytymiseen ja hoitovasteeseen.

Kaiken kaikkiaan A498-solulinja on tärkeä väline munuaissyöpätutkimuksessa, mikä helpottaa tehokkaampien hoitostrategioiden kehittämistä ja lisää ymmärrystä munuaissyövän biologiasta.

Kudos
Munuaiset
Sairaus
Munuaissolusyöpä
Synonyymit
  • A-498

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä. Muodostaa erilaistumatonta karsinoomaa, muodostaa kasvaimia myös kymosyyttiseerumilla hoidetuissa vastasyntyneissä hiirissä
Ploidisuus
Bimodaalinen, tetraploidi
MSI-tila
Vakaa (MSS)
Kaksinkertaistumisaika
62 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
A498 (Cytionin luettelonumero 300113)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1056

05Ilmentyminen ja alttius

Isoentsyymit
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 2, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2 tuottaa yhtenäisen yksikerroksen 4 päivän kuluessa.
Nesteen uusiminen
3 päivän välein
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 2 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24–48 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
52 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen