Mine otse sisu juurde
A498 Rakud
Kude
Neerud
Haigus
Neerurakk-kartsinoom
Sünonüümid
A-498

Dokumendid

A498 Rakud

Cell line · Toote number 300113

A498-rakud on inimese neerurakk-kartsinoomi rakuliin, mis on saadud 58-aastase valgenahalise mehe neerukudest. Neid rakke kasutatakse laialdaselt ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

A498 rakud on inimese neerurakk-kartsinoomi rakuliin, mis on saadud 58-aastase kaukaasia mehe neerukoes. Neid rakke kasutatakse laialdaselt neeruvähiga seotud teadusuuringutes, eelkõige selgepiirilise neerurakk-kartsinoomi uurimiseks, mis on täiskasvanute kõige levinum neeruvähi tüüp.

A498 rakuliini iseloomustab epiteelilaadne morfoloogia ja see on olnud väärtuslik mudel neerukartsinogeneesi molekulaar- ja rakumehhanismide uurimiseks. Nendel rakkudel on mitmeid neeruvähile iseloomulikke tunnuseid, sealhulgas muutused rakutsükli regulatsioonis, apoptoosis ja angiogeneesis osalevate geenide ekspressioonis.

A498 rakud on eriti kasulikud neeruvähi puhul muutunud ainevahetusradade uurimiseks, kuna neil on eriline ainevahetusprofiil, mis hõlmab muutusi lipiidide ja glükoosi ainevahetuses. See muudab nad sobivaks metaboolse sihtrühma uuringuteks, mille käigus uuritakse, kuidas metaboolsete radade muutmine võib pärssida kasvaja kasvu.

Lisaks kasutatakse A498 rakke ravimite avastamisel ja toksikoloogilistes uuringutes, et testida uute kemoterapeutiliste ainete ja sihtteraapiate tõhusust. Neid kasutatakse ka neeruvähirakkude reaktsiooni uurimiseks hüpoksilistele tingimustele - see on soliidsete kasvajate tavaline tunnus, mis mõjutab oluliselt kasvaja käitumist ja ravivastust.

Üldiselt on rakuliin A498 oluline vahend neeruvähi uurimisel, mis hõlbustab tõhusamate ravistrateegiate väljatöötamist ja parandab meie arusaamist neeruvähi bioloogiast.

Kude
Neerud
Haigus
Neerurakk-kartsinoom
Sünonüümid
  • A-498

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel. Moodustab diferentseerimata kartsinoomi, moodustab ka tümotsüütide vastase seerumiga töödeldud vastsündinud hiirtel kasvajaid
Ploidsus
Bimodaalne, tetraploidne
MSI staatus
Stabiilne (MSS)
Kahekordistumisaeg
62 tundi

04Tunnused

Viide
A498 (Cytioni katalooginumber 300113)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1056

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Isoensüümid
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 2, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2 annab 4 päeva jooksul konfluentse monokihi.
Vedeliku vahetus
Iga 3 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 2 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24–48 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
52 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia