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Células A498
Tecido
Rim
Doença
Carcinoma de células renais
Sinónimos
A-498

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Células A498

Cell line · Número do produto 300113

As células A498 são uma linha celular de carcinoma renal humano derivada do tecido renal de um homem caucasiano de 58 anos. Estas células são amplamente utilizadas em...

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01Informações gerais

Descrição

As células A498 são uma linha celular de carcinoma de células renais humanas derivada do tecido renal de um homem caucasiano de 58 anos. Estas células são amplamente utilizadas na investigação relacionada com o cancro do rim, particularmente para estudar o carcinoma de células renais de células claras, que é o tipo mais comum de cancro do rim em adultos.

A linha celular A498 caracteriza-se pela sua morfologia epitelial e tem sido um modelo valioso para a investigação dos mecanismos moleculares e celulares da carcinogénese renal. Estas células apresentam várias caraterísticas típicas do cancro renal, incluindo alterações na expressão de genes envolvidos na regulação do ciclo celular, apoptose e angiogénese.

As células A498 são particularmente úteis para examinar as vias metabólicas alteradas no cancro do rim, uma vez que apresentam um perfil metabólico distinto que inclui alterações no metabolismo dos lípidos e da glicose. Este aspeto torna-as adequadas para estudos de direcionamento metabólico, que exploram a forma como a alteração das vias metabólicas pode inibir o crescimento do tumor.

Além disso, as células A498 são utilizadas na descoberta de medicamentos e em estudos de toxicologia para testar a eficácia de novos agentes quimioterapêuticos e terapias direcionadas. São também utilizadas para estudar a resposta das células de cancro renal a condições de hipoxia - uma caraterística comum dos tumores sólidos que influencia significativamente o comportamento do tumor e a resposta ao tratamento.

Globalmente, a linha celular A498 é uma ferramenta essencial na investigação do cancro renal, facilitando o desenvolvimento de estratégias terapêuticas mais eficazes e melhorando a nossa compreensão da biologia do cancro renal.

Tecido
Rim
Doença
Carcinoma de células renais
Sinónimos
  • A-498

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus. Forma carcinoma indiferenciado, também forma tumores em ratinhos recém-nascidos tratados com soro anti-timócito
Estado de ploidia
Bimodal, tetraploide
Estado do MSI
Estável (MSS)
Tempo de duplicação
62 horas

04Identificadores

Referência
A498 (número de catálogo Cytion 300113)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1056

05Expressão e suscetibilidade

Isoenzimas
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 2, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm² resultará numa monocamada confluente em 4 dias.
Renovação de fluidos
A cada 3 dias
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 2 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 a 48 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
52 anos
Etnia
Caucasiano