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KYSE-410
Gewebe
Speiseröhre
Krankheit
Plattenepithelkarzinom der Speiseröhre
Synonyme
KYSE 410, KYSE410, Kyse410, KYSE0410

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KYSE-410

Cell line · Artikelnummer 305122

KYSE-410 is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line that was established from a primary tumor resected from an adult patient. This cel...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

KYSE-410 ist eine humane Ösophaguszellkarzinom-Zelllinie (ESCC), die aus einem Primärtumor eines erwachsenen Patienten gewonnen wurde. Diese Zelllinie ist Teil der KYSE-Serie, die mehrere ESCC-Modelle umfasst, um ein umfassendes Instrument zur Untersuchung der verschiedenen Aspekte von Speiseröhrenkrebs zu bieten. KYSE-410-Zellen haben eine Verdopplungszeit von 24,2 Stunden, was auf eine mäßige Proliferationsfähigkeit hinweist. Sie wachsen als adhärente Monolayer, ein gemeinsames Merkmal von epithelialen Krebszellen, und zeigen eine relativ einheitliche Morphologie unter dem Phasenkontrastmikroskop.

Auf genetischer Ebene fällt KYSE-410 besonders durch seine epigenetischen Veränderungen auf. Das p16 (INK4a)-Gen in KYSE-410 weist eine Hypermethylierung der 5'-CpG-Inseln auf, eine Veränderung, die zum Silencing dieses wichtigen Tumorsuppressorgens führt. Diese epigenetische Veränderung ist bei vielen Krebsarten, darunter auch ESCC, ein wesentlicher Faktor der Onkogenese, da sie zum Verlust der Zellzyklusregulierung und zur unkontrollierten Zellproliferation führt. Trotzdem behält KYSE-410 eine Wildtyp-Konfiguration für das p15 (INK4b)-Gen, was auf eine selektive Inaktivierung von p16 hinweist, die für bestimmte Krebs-Subtypen typisch ist.

Die KYSE-410-Zelllinie ist tumorerzeugend, wie ihre Fähigkeit zur Tumorbildung bei der Implantation in athymische Nacktmäuse zeigt. Die histologische Analyse dieser Tumore zeigt Merkmale, die mit Plattenepithelkarzinomen übereinstimmen, was KYSE-410 zu einem relevanten Modell für In-vivo-Studien macht. Diese Zelllinie ist sehr wertvoll für die Forschung zum Verständnis der Rolle epigenetischer Veränderungen bei der Krebsentstehung sowie für die Prüfung der Wirksamkeit von Therapien, die auf epigenetische Regulatoren abzielen, obwohl sie nicht für therapeutische oder In-vivo-Anwendungen vorgesehen ist.

Gewebe
Speiseröhre
Krankheit
Plattenepithelkarzinom der Speiseröhre
Synonyme
  • KYSE 410
  • KYSE410
  • Kyse410
  • KYSE0410

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial
Verdopplungszeit
32 bis 45 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
KYSE-410 (Cytion Katalognummer 305122)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1352

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1–3 × 10⁴/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
51 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Asiatisch