Премини към съдържанието
KYSE-410
Тъкан
Езофагус
Заболяване
Езофагеален плоскоклетъчен карцином
Синоними
KYSE 410, KYSE410, Kyse410, KYSE0410

Документи

KYSE-410

Cell line · Номер на продукта 305122

KYSE-410 is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line that was established from a primary tumor resected from an adult patient. This cel...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

KYSE-410 е човешка клетъчна линия на плоскоклетъчен карцином на хранопровода (ESCC), създадена от първичен тумор, отстранен от възрастен пациент. Тази клетъчна линия е част от серията KYSE, която включва множество модели на ESCC, предназначени да осигурят цялостен инструмент за изучаване на различни аспекти на рака на хранопровода. Времето за удвояване на клетките KYSE-410 е 24,2 часа, което отразява умерен пролиферативен капацитет. Те растат като адхерентни монослоеве, което е често срещана характеристика сред епителните ракови клетки, и показват относително еднаква морфология при фазово-контрастна микроскопия.

На генетично ниво KYSE-410 се отличава с особени епигенетични промени. Генът p16 (INK4a) в KYSE-410 показва хиперметилиране на 5' CpG острови, модификация, която води до заглушаване на този важен тумор супресорен ген. Тази епигенетична промяна е важен фактор за онкогенезата при много видове рак, включително и при ESCC, тъй като води до загуба на регулацията на клетъчния цикъл и неконтролируема клетъчна пролиферация. Въпреки това KYSE-410 запазва конфигурацията на дивия тип за гена p15 (INK4b), подчертавайки селективното инактивиране на p16, което е типично за някои подтипове рак.

Клетъчната линия KYSE-410 е туморогенна, което се доказва от способността ѝ да предизвиква образуване на тумори при имплантиране в атимни голи мишки. Хистологичният анализ на тези тумори показва характеристики, съответстващи на плоскоклетъчен карцином, което прави KYSE-410 подходящ модел за in vivo проучвания. Тази клетъчна линия е изключително ценна за изследвания, насочени към разбиране на ролята на епигенетичните модификации в прогресията на рака, както и за тестване на ефикасността на терапии, насочени към епигенетичните регулатори, въпреки че не е предназначена за терапевтични или in vivo приложения.

Тъкан
Езофагус
Заболяване
Езофагеален плоскоклетъчен карцином
Синоними
  • KYSE 410
  • KYSE410
  • Kyse410
  • KYSE0410

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Епителиален
Време за удвояване
32 до 45 часа

04Идентификатори

Източник
KYSE-410 (каталожен номер на Cytion 305122)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1352

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1–3 × 10⁴/см²
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
51 години
Етническа принадлежност
Азиатски